Nature.com نى زىيارەت قىلغىنىڭىزغا رەھمەت.سىز ئىشلىتىۋاتقان توركۆرگۈچ نۇسخىسىنىڭ CSS قوللىشى چەكلىك.ئەڭ ياخشى تەجرىبە ئۈچۈن يېڭىلانغان تور كۆرگۈچنى ئىشلىتىشىڭىزنى تەۋسىيە قىلىمىز (ياكى Internet Explorer دىكى ماسلىشىشچان ھالەتنى چەكلەڭ).بۇ جەرياندا ، داۋاملىق قوللاشقا كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن ، تور بېكەتنى ئۇسلۇب ۋە JavaScript ئىشلەتمەيمىز.
Toxoplasma gondii ھۈجەيرە ئىچىدىكى پروتوزوز پارازىت قۇرت بولۇپ ، يۇقۇملانغان ساھىبجامالنىڭ مىكرو مۇھىتىنى تەڭشەيدۇ ۋە مېڭە ئۆسمىسىنىڭ ئۆسۈشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئىكەنلىكى مەلۇم.بۇ تەتقىقاتتا ، بىز زەھەرلىك چېكىملىكتىن يۇقۇملانغان تاشقى ھۈجەيرە miRNA-21 نىڭ مېڭە ئۆسمىسىنىڭ ئۆسۈشىنى ئىلگىرى سۈرىدىغانلىقىنى پەرەز قىلىمىز.Toxoplasma ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 مىكرو ئورگانىزىمنىڭ ئېكسپوزىتسىيەسى ئالاھىدىلىككە ئىگە بولۇپ ، U87 گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ ئىچكىلىشىشى دەلىللەندى.Exosomal microRNA ئىپادىلەش ئارخىپى Toxoplasma gondii ۋە ئۆسمىنى رەتلەش بىلەن مۇناسىۋەتلىك مىكرو RNA ۋە microRNA-21A-5p گۇرۇپپىلىرى ئارقىلىق تەھلىل قىلىنغان.بىز يەنە U87 گىلوما ھۈجەيرىسىدىكى ئۆسمىگە مۇناسىۋەتلىك گېننىڭ mRNA سەۋىيىسىنى تەكشۈردۇق ، تاشقى ھۈجەيرە ئىچىدىكى miR-21 سەۋىيىسىنى ۋە تاشقى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئىنسانلارنىڭ U87 گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ كۆپىيىشىگە كۆرسىتىدىغان تەسىرىنى تەكشۈردۇق.Toxoplasma gondii بىلەن يۇقۇملانغان U87 گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ تاشقى كۆرۈنۈشىدە ، microRNA-21 نىڭ ئىپادىلىنىشى كۈچىيىپ ، ئانتىتېلاغا قارشى گېننىڭ (FoxO1, PTEN ۋە PDCD4) پائالىيىتى تۆۋەنلەيدۇ.Toxoplasma بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە U87 گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ كۆپىيىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.Exosomes چاشقان ئۆسمىسى مودېلىدا U87 ھۈجەيرىسىنىڭ ئۆسۈشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ.بىز Toxoplasma ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 مىكرو ئورگانىزىمىدا exosomal miR-21 نىڭ كۆپىيىشى ئانتىتېلا گېنلىرىنى كونترول قىلىش ئارقىلىق U87 گىلوما ھۈجەيرىسىدىكى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆسۈشىنى ئىلگىرى سۈرۈش رولىنى ئوينايدۇ.
مۆلچەرلىنىشىچە ، 2018-يىلى دۇنيا مىقياسىدا 18 مىليون 100 مىڭدىن ئارتۇق ئىلغار راك كېسىلى بايقالغان ، ھەر يىلى تەخمىنەن 297،000 مەركىزىي نېرۋا سىستېمىسى ئۆسمىسى (بارلىق ئۆسمىنىڭ% 1.6) گە دىئاگنوز قويۇلغان.ئىلگىرىكى تەتقىقاتلاردا ئىنسانلارنىڭ مېڭە ئۆسمىسىنى تەرەققىي قىلدۇرۇشتىكى خەتەرلىك ئامىللارنىڭ ھەر خىل خىمىيىلىك مەھسۇلاتلار ، ئائىلە تارىخى ۋە باش داۋالاش ۋە دىئاگنوز قويۇش ئۈسكۈنىلىرىدىكى ئىئونلاشتۇرۇلغان رادىئاتسىيەنى ئۆز ئىچىگە ئالىدىغانلىقى كۆرسىتىلدى.قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ يامان سۈپەتلىك ئۆسمىنىڭ ھەقىقىي سەۋەبى ئېنىق ئەمەس.دۇنيادىكى بارلىق راكلارنىڭ تەخمىنەن% 20 ى ۋىرۇس ، باكتېرىيە ۋە پارازىت قۇرت قاتارلىقلارنى ئۆز ئىچىگە ئالغان يۇقۇملۇق ماددىلار كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.يۇقۇملۇق كېسەللىك قوزغاتقۇچى ساھىبجامالنىڭ DNA رېمونت قىلىش ۋە ھۈجەيرە ئايلىنىشى قاتارلىق گېن مېخانىزىمىنى قالايمىقانلاشتۇرۇپ ، ئاستا خاراكتېرلىك ياللۇغلىنىشنى ۋە ئىممۇنىتېت سىستېمىسىنىڭ بۇزۇلۇشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.
ئادەم راكى بىلەن مۇناسىۋەتلىك يۇقۇملۇق كېسەللىكلەر ئەڭ كۆپ ئۇچرايدىغان ۋىرۇسلۇق كېسەللىك قوزغاتقۇچى بولۇپ ، ئۇلار ئىنسانلارنىڭ قان تومۇر ۋىرۇسى ۋە B ۋە C تىپلىق جىگەر ياللۇغى ۋىرۇسىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.پارازىت قۇرت ئادەم راكىنىڭ تەرەققىي قىلىشىدا يوشۇرۇن رول ئوينايدۇ.شىستوسوما ، Opishorchis viverrini ، O. felineus ، Clonorchis sinensis ۋە Hymenolepis nana قاتارلىق بىر قانچە پارازىت قۇرت تۈرى ئىنسانلارنىڭ راك كېسىلىگە گىرىپتار بولغانلارنىڭ سانى 6،7،8.
Toxoplasma gondii ھۈجەيرە ئىچىدىكى پروتوزوئەن بولۇپ ، يۇقۇملانغان ساھىبجاماللارنىڭ مىكرو مۇھىتىنى تەڭشەيدۇ.بۇ پارازىت قۇرت دۇنيا نوپۇسىنىڭ تەخمىنەن% 30 نى يۇقۇملاندۇرىدىغانلىقى ، پۈتكۈل نوپۇسنىڭ خەۋىپىگە دۇچ كېلىدىغانلىقى مۆلچەرلەنگەن.Toxoplasma gondii مەركىزىي نېرۋا سىستېمىسى (CNS) نى ئۆز ئىچىگە ئالغان مۇھىم ئەزالارنى يۇقۇملاندۇرىدۇ ۋە ئەجەللىك مېڭە پەردە ياللۇغى ۋە مېڭە ياللۇغى قاتارلىق ئېغىر كېسەللىكلەرنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، بولۇپمۇ ئىممۇنىتېت كۈچى ئاجىز بىمارلاردا.قانداقلا بولمىسۇن ، Toxoplasma gondii يەنە ئىممۇنىتېت ئىقتىدارى ئاجىز كىشىلەرنىڭ ھۈجەيرىسىنىڭ ئۆسۈشى ۋە ئىممۇنىتېت ئىنكاسىنى تەڭشەش ئارقىلىق يۇقۇملانغان ساھىبجامالنىڭ مۇھىتىنى ئۆزگەرتەلەيدۇ ، بۇ كېسەللىك ئالامىتى بولمىغان ئاستا خاراكتېرلىك يۇقۇملىنىشنى ساقلايدۇ.قىزىقارلىق يېرى ، T. gondii نىڭ تارقىلىشى بىلەن مېڭە ئۆسمىسىنىڭ پەيدا بولۇشى ئوتتۇرىسىدىكى باغلىنىشنى كۆزدە تۇتقاندا ، بەزى دوكلاتلاردا vivo ساھىبخانلىقىدا سوزۇلما T. gondii يۇقۇملىنىش سەۋەبىدىن مۇھىت ئۆزگىرىشى ئۆسمىنىڭ مىكرو مۇھىتقا ئوخشايدىغانلىقى كۆرسىتىلدى.
Exosomes قوشنا ھۈجەيرىلەردىن ئاقسىل ۋە يادرو كىسلاتاسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بىئولوگىيىلىك مەزمۇنلارنى يەتكۈزىدىغان ھۈجەيرە ئارا ئالاقە دەپ ئاتىلىدۇ.تاشقى كېسەللىكلەر ئۆسمە مىكرو مۇھىتتىكى ئۆسمىگە قارشى بىئولوگىيىلىك جەريانغا تەسىر كۆرسىتىدۇ.بولۇپمۇ miRNAs (miRNAs) ، ئۇزۇنلۇقى تەخمىنەن 22 يادرولىق كىچىك كودلاشتۇرمايدىغان RNA لار ، ترانسكرىپسىيەدىن كېيىنكى مۇھىم گېن تەڭشىگۈچ بولۇپ ، miRNA كەلتۈرۈپ چىقارغان سۈكۈت قىلىش سىستېمىسى (miRISC) ئارقىلىق ئىنسانلارنىڭ mRNA نىڭ% 30 تىن كۆپرەكىنى كونترول قىلىدۇ.Toxoplasma gondii يۇقۇملانغان ساھىبجاماللاردىكى miRNA ئىپادىسىنى كونترول قىلىش ئارقىلىق بىئولوگىيىلىك جەريانلارنى قالايمىقانلاشتۇرۇۋېتىدۇ.ساھىبجامال miRNAs پارازىت قۇرتنىڭ ھايات قېلىش ئىستراتېگىيىسىنى ئەمەلگە ئاشۇرۇش ئۈچۈن ساھىبجامال بىئولوگىيىلىك جەريانلارنى تەڭشەشتىكى مۇھىم سىگناللارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.شۇڭا ، T. gondii بىلەن يۇقۇملانغاندىن كېيىن ساھىبجامال miRNA ئارخىپىدىكى ئۆزگىرىشلەرنى تەتقىق قىلىش بىزنىڭ ساھىبجامال بىلەن T. gondii ئوتتۇرىسىدىكى ئۆز-ئارا تەسىرنى تېخىمۇ ئېنىق چۈشىنىشىمىزگە ياردەم بېرىدۇ.دەرۋەقە ، تىرۇگنانام قاتارلىقلار.15 T. T. gondii ئۆسمىنىڭ ئۆسۈشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئالاھىدە ساھىبجامال miRNA غا بولغان ئىپادىسىنى ئۆزگەرتىش ئارقىلىق مېڭە راكىنى پەيدا قىلىشنى ئىلگىرى سۈرىدۇ ۋە T. gondii نىڭ تەجرىبە ھايۋانلىرىدا گىلوما پەيدا قىلىدىغانلىقىنى بايقىدى.
بۇ تەتقىقات Toxoplasma BV2 بىلەن يۇقۇملانغان ساھىبجامال مىكرو ئورگانىزىمدىكى exosomal miR-21 نىڭ ئۆزگىرىشىنى ئاساس قىلىدۇ.بىز ھەددىدىن زىيادە بېسىم قىلىنغان miR-21 نىڭ نىشانى بولغان FoxO1 / p27 نىڭ يادروسىدا ساقلانغانلىقتىن ، ئۆزگەرتىلگەن تاشقى miR-21 نىڭ U87 گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ ئۆسۈشىدىكى رولىنى كۆزىتتۇق.
BV2 دىن ھاسىل بولغان Exosomes پەرقلىق مەركەزدىن قاچۇرۇش ئۇسۇلى ئارقىلىق قولغا كەلتۈرۈلۈپ ، ھەر خىل ئۇسۇللار ئارقىلىق دەلىللىنىپ ، ھۈجەيرە زاپچاسلىرى ياكى باشقا تومۇرلارنىڭ بۇلغىنىشىنىڭ ئالدىنى ئالدى.SDS- پولىئاكرىلامىد گېلى ئېلېكتروفورىسى (SDS-PAGE) BV2 ھۈجەيرىسىدىن ئېلىنغان ئاقسىل ۋە تاشقى ھۈجەيرە (1A رەسىم) ئارىسىدا ئالاھىدە ئەندىزىلەرنى كۆرسەتتى (1A رەسىم) ، ئەۋرىشكە ئالكىسنىڭ بار-يوقلۇقىغا قارىتا باھالاندى ، بۇ غەربنىڭ تاشقى ئاقسىل بەلگىسىنىڭ پارچىلىنىشى بىلەن تەھلىل قىلىنغان.Alix بەلگىسى تاشقى ئاقسىلدا بايقالغان ، ئەمما BV2 ھۈجەيرىلىك لىزات ئاقسىلىدا يوق (1B رەسىم).ئۇنىڭدىن باشقا ، BV2 دىن ھاسىل بولغان ئېكولوگىيىلىك ماددىلاردىن ساپلاشتۇرۇلغان RNA بىئولوگىيىلىك ئانالىز قىلىش ئارقىلىق تەھلىل قىلىنغان.18S ۋە 28S رىبوسومال تارماق گەۋدىسى تاشقى RNA كۆچۈش ئەندىزىسىدە ناھايىتى ئاز كۆرۈلىدۇ ، بۇ ئىشەنچلىك ساپلىقنى كۆرسىتىدۇ (1C رەسىم).ئاخىرىدا ، ئېلېكترونلۇق مىكروسكوپتا كۆزىتىلگەن ئېكولوگىيىلىك ماددىلارنىڭ چوڭلۇقى تەخمىنەن 60-150 nm بولۇپ ، تاشقى مورفولوگىيەگە خاس لوڭقىغا ئوخشايدىغان قۇرۇلما بارلىقى كۆرسىتىلدى (1D رەسىم).
BV2 ھۈجەيرىسىدىن ھاسىل بولغان تاشقى كېسەللىكلەرنىڭ ئالاھىدىلىكى.(1) بىخەتەرلىك سانلىق مەلۇمات جەدۋىلى بېتى.ئاقسىل BV2 ھۈجەيرىسىدىن ئايرىلدى ياكى BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە.ئاقسىل ئەندىزىسى ھۈجەيرىلەر بىلەن تاشقى كېسەللىكلەر ئارىسىدا پەرقلىنىدۇ.(2) تاشقى بەلگە (Alix) نىڭ غەرب توپى ئانالىزى.(3) BV2 ھۈجەيرىسىدىن ساپلاشتۇرۇلغان RNA ۋە BV2 ھاسىل قىلىنغان ئېكولوگىيىلىك ماددىلارنى بىئولوگىيىلىك ئانالىز قىلىش ئارقىلىق باھالاش.شۇڭا ، BV2 ھۈجەيرىسىدىكى 18S ۋە 28S رىبوسومال تارماق ئېلېمېنتلار RNA دا ناھايىتى ئاز ئۇچرايدۇ.(4) تارقىتىش ئېلېكترونلۇق مىكروسكوپتا BV2 ھۈجەيرىسىدىن ئايرىۋېتىلگەن تاشقى ماددىلارنىڭ% 2 لىك ئۇران ئاتسېتات بىلەن مەنپىي داغلانغانلىقى كۆرسىتىلدى.Exosomes نىڭ چوڭلۇقى تەخمىنەن 60-150 nm بولۇپ ، لوڭقا شەكىللىك (سۇڭ ۋە جوڭ ، ئېلان قىلىنمىغان سانلىق مەلۇمات).
BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرىلەرنىڭ U87 ئىنسانلارنىڭ گىلوما ھۈجەيرىسىگە ھۈجەيرىسىنىڭ ئىچكىلىشىشى ئۆز ئارا مىكروسكوپ ئارقىلىق كۆزىتىلدى.PKH26 بەلگىسى قويۇلغان Exosomes U87 ھۈجەيرىسىنىڭ سىپوپلازمىسىدا يەرلىكلەشتۈرۈلگەن.Nuclei DAPI بىلەن بويالغان (2A رەسىم) ، بۇ BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرىلەرنىڭ ساھىبخان ھۈجەيرىلەر تەرىپىدىن ئۆزلەشتۈرۈلۈپ ، قوبۇل قىلغۇچى ھۈجەيرىلەرنىڭ مۇھىتىغا تەسىر كۆرسىتەلەيدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرىلەرنىڭ U87 گىلوما ھۈجەيرىسىگە ئايلىنىشى ۋە Toxoplasma RH بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە U87 گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ كۆپىيىشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى.(A) ئېكولوگىيىلىك مىكروسكوپ ئارقىلىق ئۆلچەنگەن U87 ھۈجەيرىسى تەرىپىدىن ئورالغان Exosomes.U87 گىلوما ھۈجەيرىسىگە PKH26 (قىزىل) بەلگىسى قويۇلغان ياكى 24 سائەت كونترول قىلىنمىغان تاشقى كۆرۈنۈشلەر سىڭدۈرۈلگەن.يادروسى DAPI (كۆك) بىلەن بويالغاندىن كېيىن ، ماسلاشتۇرۇلغان مىكروسكوپتا كۆزىتىلگەن (كۆلەم بالدىقى: 10 mm ، x 3000).(2) U87 گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ كۆپىيىشى ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىشى ئارقىلىق بېكىتىلدى.U87 گىلوما ھۈجەيرىسى كۆرسىتىلگەن ۋاقىتتىكى تاشقى كېسەللىكلەر بىلەن بىر تەرەپ قىلىندى. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ t سىنىقى ئارقىلىق ئېرىشكەن. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ t سىنىقى ئارقىلىق ئېرىشكەن. * P <0,05 получено по t-критерию Стьюдента. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقى ئارقىلىق. * P <0.05 通过 学生 t 检验 获得。 * P <0.05 * P <0,05, полученный с помощу t-критерия Стьюдента. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقىدىن پايدىلىنىپ ئېرىشكەن.
BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرىلەرنىڭ U87 گىلوما ھۈجەيرىسىگە ئۆزلەشتۈرۈلگەنلىكىنى جەزملەشتۈرگەندىن كېيىن ، بىز ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىش ئانالىزى ئېلىپ بېرىپ ، BV2 دىن ھاسىل بولغان زەھەرلىك چېكىملىكتىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئىنسانلارنىڭ گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ يېتىلىشىدىكى رولىنى تەكشۈردۇق.U87 ھۈجەيرىسىنى T. gondii ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 ھۈجەيرىسىدىن داۋالاش ئارقىلىق داۋالاشتا كۆرسىتىلىشىچە ، T. gondii ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە U87 ھۈجەيرىسىنىڭ كونترول قىلىنىشىغا سېلىشتۇرغاندا كۆرۈنەرلىك يۇقىرىلاپ كېتىشىنى كەلتۈرۈپ چىقارغان (2B رەسىم).
ئۇنىڭدىن باشقا ، U118 ھۈجەيرىسىنىڭ ئۆسۈشى U87 بىلەن ئوخشاش نەتىجىگە ئېرىشتى ، چۈنكى Toxoplasma غىدىقلانغان تاشقى كېسەللىكلەر ئەڭ يۇقىرى دەرىجىدىكى كېڭىيىشنى كەلتۈرۈپ چىقاردى (سانلىق مەلۇماتلار كۆرسىتىلمىدى).بۇ سانلىق مەلۇماتلارغا ئاساسەن ، بىز BV2 دىن ھاسىل بولغان Toxoplasma بىلەن يۇقۇملانغان تاشقى كېسەلنىڭ گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ كۆپىيىشىدە موھىم رول ئوينايدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرەلەيمىز.
Toxoplasma ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆسمىنىڭ يېتىلىشىگە كۆرسىتىدىغان تەسىرىنى تەكشۈرۈش ئۈچۈن ، بىز كېنوگرافىيە مودېلى ئۈچۈن يالىڭاچ چاشقانغا U87 گىلوما ھۈجەيرىسىنى ئوكۇل قىلىپ ، BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى كېسەللىكلەر ياكى RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى كېسەلنى ئوكۇل قىلدۇق.ئۆسمە 1 ھەپتىدىن كېيىن كۆرۈنەرلىك بولغاندىن كېيىن ، ھەر بىر تەجرىبە گۇرۇپپىسى 5 چاشقان ئۆسمىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىگە ئاساسەن بۆلۈنۈپ ، ئوخشاش باشلىنىش نۇقتىسىنى بېكىتتى ، ئۆسمىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى 22 كۈن ئۆلچەم قىلىندى.
U87 xenograft مودېلى بولغان چاشقانلاردا 22-كۈنى BV2 دىن ھاسىل بولغان RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان تاشقى گۇرۇپپىدا ئۆسمىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى ۋە ئېغىرلىقى كۆرۈنەرلىك چوڭ بولغان (3A ، B رەسىم).يەنە بىر جەھەتتىن ، BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى كېسەللىكلەر گۇرۇپپىسى بىلەن تاشقى كېسەللىكلەر دوختۇرىدىن كېيىن كونترول گۇرۇپپىسىنىڭ ئارىسىدا ئۆسمىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىدە كۆرۈنەرلىك پەرق يوق.ئۇنىڭدىن باشقا ، گىلوما ھۈجەيرىسى ۋە تاشقى ھۈجەيرىلەر بىلەن ئوكۇل قىلىنغان چاشقانلار RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 مەنبەلىك تاشقى كېسەللىكلەر گۇرۇپپىسىدىكى ئەڭ چوڭ ئۆسمىنىڭ مىقدارىنى كۆرۈنۈشتە نامايان قىلدى (3C رەسىم).بۇ نەتىجىلەر BV2 دىن ھاسىل بولغان Toxoplasma بىلەن يۇقۇملانغان چاشقاننىڭ چاشقان ئۆسمىسى مودېلىدا گىلوما ئۆسۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.
U87 xenograft مائۇس مودېلىدىكى BV2 دىن ھاسىل بولغان Excomes نىڭ Oncogenesis (AC).BV2 دىن ھاسىل بولغان RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BALB / c يالىڭاچ چاشقانلاردا ئۆسمىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى (A) ۋە ئېغىرلىقى كۆرۈنەرلىك ئاشتى.BALB / c يالىڭاچ چاشقان (C) ماترىگېل ئارىلاشمىسىدا توختىتىلغان 1 x 107 U87 ھۈجەيرىسى بىلەن تېرە ئاستىغا ئوكۇل قىلىندى.ئوكۇل قىلىنىپ ئالتە كۈندىن كېيىن ، 100 μ mg BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە چاشقانلاردا داۋالاندى.ئۆسمىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى ۋە ئېغىرلىقى ئايرىم-ئايرىم ھالدا كۆرسىتىلگەن كۈنلەردە ۋە قۇربانلىقتىن كېيىن ئۆلچەم قىلىنغان. * P <0.05. * P <0.05. * Р <0,05. * P <0.05. * P <0.05。 * P <0.05。 * Р <0,05. * P <0.05.
سانلىق مەلۇماتتا كۆرسىتىلىشچە ، ئىممۇنىتېت كۈچى ياكى ئۆسمىنىڭ يېتىلىشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك 37 miRNAs (16 ھەددىدىن زىيادە بېسىم قىلىنغان ۋە 21 تۆۋەنلەش بېسىمى) زەھەرلىك چېكىملىك ​​RH جىددىيلىكى بىلەن يۇقۇملانغاندىن كېيىن مىكروبلوگدا كۆرۈنەرلىك ئۆزگەرگەن (4A رەسىم).ئۆزگەرتىلگەن miRNA لار ئارىسىدىكى miR-21 نىڭ نىسپىي ئىپادىلىنىش دەرىجىسى BV2 دىن ھاسىل قىلىنغان تاشقى كۆرۈنۈشتە ، BV2 ۋە U87 ھۈجەيرىسى بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان تاشقى كۆرۈنۈشتە ھەقىقىي RT-PCR تەرىپىدىن ئىسپاتلانغان.MiR-21 نىڭ ئىپادىلىنىشى Toxoplasma gondii (RH جىددىيلىكى) بىلەن يۇقۇملانغان BV2 ھۈجەيرىسىدىكى ئېكولوگىيىلىك ماددىلارنىڭ كۆرۈنەرلىك ئاشقانلىقىنى كۆرسەتتى (4B رەسىم).BV2 ۋە U87 ھۈجەيرىسىدىكى miR-21 نىڭ نىسپىي ئىپادىلەش دەرىجىسى ئۆزگەرتىلگەن تاشقى كۆرۈنۈشنى قوبۇل قىلغاندىن كېيىن ئۆستى (4B رەسىم).ئۆسمە بىمارلىرى ۋە Toxoplasma gondii (ME49 جىددىيلىكى) بىلەن يۇقۇملانغان چاشقانلارنىڭ مېڭە توقۇلمىلىرىدىكى miR-21 ئىپادىسىنىڭ سېلىشتۇرما دەرىجىسى ئايرىم-ئايرىم ھالدا كونترول قىلىشتىن يۇقىرى بولغان (4C رەسىم).بۇ نەتىجىلەر ۋىرۇس ۋە vivo دىكى ئالدىن پەرەز قىلىنغان ۋە جەزملەشتۈرۈلگەن مىكرو RNA نىڭ ئىپادىلىنىش سەۋىيىسىنىڭ پەرقى بىلەن مۇناسىۋەتلىك.
Toxoplasma gondii (RH) بىلەن يۇقۇملانغان مىكرو ئورگانىزىمدا exosomal miP-21a-5p نىڭ ئىپادىلىنىشىدىكى ئۆزگىرىش.(A) T. gondii RH يۇقۇملانغاندىن كېيىن ئىممۇنىتېت ياكى ئۆسمىنىڭ يېتىلىشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك siRNA دا كۆرۈنەرلىك ئۆزگىرىشلەرنى كۆرسىتىدۇ..(C) نىسپىي miR-21 ئىپادىلەش سەۋىيىسى ئۆسمە بىمارلىرىنىڭ مېڭە توقۇلمىلىرىدا (N = 3) ۋە Toxoplasma gondii (ME49 جىددىيلىكى) بىلەن يۇقۇملانغان چاشقانلاردا بايقالغان (N = 3). * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ t سىنىقى ئارقىلىق ئېرىشكەن. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ t سىنىقى ئارقىلىق ئېرىشكەن. * P <0,05 было получено с помощу t-критерия Стьюдента. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقىدىن پايدىلىنىپ قولغا كەلتۈرۈلدى. * P <0.05 通过 学生 t 检验 获得。 * P <0.05 * P <0,05, полученный с помощу t-критерия Стьюдента. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقىدىن پايدىلىنىپ ئېرىشكەن.
RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 ھۈجەيرىسىدىن چىققان تاشقى كېسەللىكلەر vivo ۋە ۋىرۇستا گىلومانىڭ ئۆسۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى (2 ، 3-رەسىم).مۇناسىۋەتلىك mRNA لارنى بايقاش ئۈچۈن ، بىز BV2 ياكى RH BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان U87 ھۈجەيرىسىدىكى ئانتىتېلاغا قارشى نىشانلىق گېننىڭ MRNA سەۋىيىسىنى تەكشۈردۇق.بىيو ئۇچۇر تېخنىكىسى ئانالىزىدا كۆرسىتىلىشىچە ، FoxO1 ، PTEN ۋە PDCD4 گېنىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بىر قانچە ئۆسمىگە مۇناسىۋەتلىك گېنلارنىڭ miR-2121,22 باغلاش ئورنى بار.RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 مەنبەلىك تاشقى ھۈجەيرىلەردە mRNA نىڭ ئانتىتېلاغا قارشى نىشانلىق گېنى BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرىلەرگە سېلىشتۇرغاندا تۆۋەنلىگەن (5A رەسىم).FoxO1 RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 مەنبەلىك تاشقى ھۈجەيرىلەردە ئاقسىلنىڭ تۆۋەنلىگەنلىكىنى BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرىلەرگە سېلىشتۇرغاندا تۆۋەنلىگەنلىكىنى كۆرسەتتى (5B رەسىم).بۇ نەتىجىلەرگە ئاساسەن ، بىز RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى كېسەللىكلەرنىڭ راكقا قارشى گېننى تەڭشەپ ، ئۆسمىنىڭ ئۆسۈشىدىكى رولىنى ساقلاپ قالىدىغانلىقىنى جەزملەشتۈرەلەيمىز.
Toxoplasma RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى كېسەللىكلەر U87 گىلوما ھۈجەيرىسىدىكى ئانتىتېلا گېنىنى توكوسپلازما RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە تەرىپىدىن بېسىشنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.(A) PBS ئېكسپورتىغا سېلىشتۇرغاندا ، T. gondii RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى كۆرۈنۈشتە FoxO1 ، PTEN ۋە PDCD4 نىڭ ھەقىقىي ۋاقىتتىكى PCR ئىپادىسى.act-actin mRNA كونترول سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن.(B) FoxO1 ئىپادىسى غەربنىڭ پارچىلىنىشى تەرىپىدىن بەلگىلىنىپ ، ImageJ پروگراممىسى ئارقىلىق زىچلىق سانلىق مەلۇماتلىرى ستاتىستىكا قىلىندى. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ t سىنىقى ئارقىلىق ئېرىشكەن. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ t سىنىقى ئارقىلىق ئېرىشكەن. * P <0,05 было получено с помощу t-критерия Стьюдента. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقىدىن پايدىلىنىپ قولغا كەلتۈرۈلدى. * P <0.05 通过 学生 t 检验 获得。 * P <0.05 * P <0,05, полученный с помощу t-критерия Стьюдента. * P <0.05 ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقىدىن پايدىلىنىپ ئېرىشكەن.
MiP-21 نىڭ تاشقى كېسەللىكتىكى ئۆسمىنىڭ مۇناسىۋەتلىك گېننى تەڭشەشكە كۆرسىتىدىغان تەسىرىنى چۈشىنىش ئۈچۈن ، U87 ھۈجەيرىسى Lipofectamine 2000 ئارقىلىق miP-21 نىڭ چەكلىمىسى بىلەن ئالماشتۇرۇلدى ۋە ھۈجەيرىلەر يۇقۇملىنىپ 24 سائەتتىن كېيىن يىغىۋېلىندى.MiR-21 ئىنگىبىتور بىلەن ئالماشتۇرۇلغان ھۈجەيرىلەردە FoxO1 ۋە p27 ئىپادىلەش دەرىجىسى qRT-PCR ئارقىلىق BV2 ھاسىل قىلغان تاشقى ھۈجەيرە بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان ھۈجەيرىلەرگە سېلىشتۇرۇلدى (6A ، B رەسىم).MiR-21 ئىنگىبىتورنىڭ U87 ھۈجەيرىسىگە ئايلىنىشى FoxO1 ۋە p27 ئىپادىسىنى كۆرۈنەرلىك كونترول قىلدى (FIG. 6).
RH ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان تاشقى BV2 دىن ھاسىل بولغان miP-21 U87 گىلوما ھۈجەيرىسىدىكى FoxO1 / p27 ئىپادىسىنى ئۆزگەرتتى.U87 ھۈجەيرىلىرى Lipofectamine 2000 ئارقىلىق miP-21 ئىنگىبىتور بىلەن ئالماشتۇرۇلدى ، ھۈجەيرىلەر 24 سائەتتىن كېيىن يىغىۋېلىندى.MiR-21 ئىنگىبىتور بىلەن ئالماشتۇرۇلغان ھۈجەيرىلەردە FoxO1 ۋە p27 ئىپادىلەش دەرىجىسى qRT-PCR (A, B) ئارقىلىق BV2 ھاسىل قىلغان تاشقى ھۈجەيرە بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان ھۈجەيرىلەرنىڭ سەۋىيىسىگە سېلىشتۇرۇلدى.
ساھىبجامالنىڭ ئىممۇنىتېت ئىنكاسىدىن قېچىش ئۈچۈن ، Toxoplasma پارازىت توقۇلما خالتىسىغا ئۆزگىرىدۇ.ئۇلار ساھىبجامالنىڭ ئۆمرىدە مېڭە ، يۈرەك ۋە سۆڭەك مۇسكۇلى قاتارلىق ھەر خىل توقۇلمىلارنى پارازىتلاشتۇرىدۇ ۋە ساھىبجامالنىڭ ئىممۇنىتېت ئىنكاسىنى تەڭشەيدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، ئۇلار ساھىبجاماللارنىڭ ھۈجەيرە دەۋرىيلىكى ۋە ئاپپتوزوزنى تەڭشەپ ، ئۇلارنىڭ كۆپىيىشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ.Toxoplasma gondii ئاساسلىقى ساھىبجامال دېۋەڭلىك ھۈجەيرىلىرى ، نېيترفىللار ۋە مونوپېت / ماكروفا نەسەبىنى يۇقۇملاندۇرىدۇ ، بۇنىڭ ئىچىدە چوڭ مېڭە مىكروبلىرى بار.Toxoplasma gondii M2 فېنوت تىپىنىڭ ماكرو پەردىسىنىڭ پەرقلىنىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، كېسەللىك قوزغاتقۇچى يۇقۇملانغاندىن كېيىن جاراھەتنىڭ ئەسلىگە كېلىشىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ ، شۇنداقلا قان تومۇر قان تومۇر قېتىشىش ۋە دانىخورەك ئۆسمىسى بىلەنمۇ مۇناسىۋەتلىك.Toxoplasma يۇقۇملىنىشنىڭ بۇ خىل كېسەللىك قوزغاتقۇسى ئۆسمىنىڭ يېتىلىشى بىلەن مۇناسىۋەتلىك بەلگە بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولۇشى مۇمكىن.Toxoplasma تەرىپىدىن باشقۇرۇلىدىغان دۈشمەنلىك مۇھىتى مۇناسىپ ئالدىنقىلارغا ئوخشايدۇ.شۇڭلاشقا ، زەھەرلىك چېكىملىكنىڭ يۇقۇملىنىشى مېڭە ئۆسمىسىنىڭ يېتىلىشىگە تۆھپە قوشۇشى كېرەك دەپ پەرەز قىلىشقا بولىدۇ.ئەمەلىيەتتە ، ھەر خىل مېڭە ئۆسمىسى بىمارلىرىنىڭ قان زەردابىدا زەھەرلىك چېكىملىكنىڭ يۇقۇش نىسبىتى يۇقىرى بولغان.ئۇنىڭدىن باشقا ، Toxoplasma gondii يەنە بىر خىل راك پەيدا قىلغۇچى ئامىل بولۇپ ، ماس قەدەمدە ھەرىكەت قىلىپ ، باشقا يۇقۇملۇق راك پەيدا قىلغۇچى ماددىلارنىڭ مېڭە ئۆسمىسىنى تەرەققىي قىلدۇرۇشىغا ياردەم بېرىشى مۇمكىن.بۇ نۇقتىدىن دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدىغىنى شۇكى ، P. falciparum ۋە Epstein-Barr ۋىرۇسى ماس قەدەمدە بۇركىتنىڭ لىمفا ئۆسمىسىنىڭ شەكىللىنىشىگە تۆھپە قوشىدۇ.
تاشقى كېسەللىكلەر دوختۇرىنىڭ راك تەتقىقاتى ساھەسىدىكى رولى كەڭ كۆلەمدە تەكشۈرۈلگەن.قانداقلا بولمىسۇن ، پارازىت قۇرت ۋە يۇقۇملانغان ساھىبجاماللار ئارىسىدىكى تاشقى كېسەللىكلەرنىڭ رولى تېخى ياخشى چۈشىنىلمىگەن.ھازىرغا قەدەر ، مەخپىي ئاقسىلنى ئۆز ئىچىگە ئالغان ھەر خىل نازارەت قىلىپ باشقۇرۇش تارماقلىرى پروتوزوزا پارازىت قۇرتلىرىنىڭ ساھىبجاماللارنىڭ ھۇجۇمىغا قارشى تۇرۇش ۋە يۇقۇملىنىشنى داۋاملاشتۇرۇشتىكى بىئولوگىيىلىك جەريانلارنى چۈشەندۈردى.يېقىندىن بۇيان ، پروتوزوئەنگە مۇناسىۋەتلىك مىكرو مىكرو ئېلېمېنتلار ۋە ئۇلارنىڭ مىكرو RNA لىرى ساھىبجاماللار بىلەن ئۆز-ئارا تەسىر كۆرسىتىپ ، ئۇلارنىڭ مەۋجۇت بولۇپ تۇرۇشى ئۈچۈن پايدىلىق مۇھىت يارىتىدىغان بىر ئۇقۇم پەيدا بولدى.شۇڭلاشقا ، يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا تەتقىق قىلىپ ، ئۆزگەرتىلگەن تاشقى ھۈجەيرە miRNAs بىلەن گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ كۆپىيىشى ئوتتۇرىسىدىكى مۇناسىۋەتنى بايقاش كېرەك.MicroRNA نىڭ ئۆزگىرىشى (گۇرۇپپا گېنى miR-30c-1 ، miR-125b-2 ، miR-23b-27b-24-1 ۋە miR-17-92) زەھەرلىك ماددىلار بىلەن يۇقۇملانغان ئىنسانلارنىڭ ماكرو پەردىسىدە STAT3 تەشۋىق قىلغۇچىغا باغلىنىدۇ ، تەڭشەلدى ۋە قارشى تۇرۇشنى قوزغىدى. -ئوپوپلازما گوندىيىدىن يۇقۇملىنىشقا تاقابىل تۇرۇش.زەھەرلىك ماددىنىڭ يۇقۇملىنىشى miR-17-5p ۋە miR-106b-5p نىڭ ئىپادىسىنى ئاشۇرىدۇ ، بۇ بىر نەچچە يۇقىرى قان بېسىم كېسەللىكى بىلەن مۇناسىۋەتلىك.بۇ سانلىق مەلۇماتلار Toxoplasma يۇقۇملىنىش ئارقىلىق تەڭشەلگەن ساھىبجامال miRNAs نىڭ ساھىبجاماللارنىڭ بىئولوگىيىلىك ھەرىكىتىدىكى پارازىت ھاياتلىق ۋە كېسەللىك قوزغاتقۇچىنىڭ مۇھىم مولېكۇلا ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
ئۆزگەرتىلگەن miRNAs يامان سۈپەتلىك ھۈجەيرىلەرنىڭ قوزغىلىشى ۋە تەرەققىي قىلىشى جەريانىدا ھەر خىل ھەرىكەتلەرگە تەسىر كۆرسىتەلەيدۇ ، مەسىلەن گىلوما: ئۆسۈش سىگنالىنىڭ ئۆزىنى ئۆزى قامدىيالىشى ، ئۆسۈشىنى چەكلەش سىگنالىغا سەزگۈر بولماسلىق ، ئاپتوماتىك داۋالاشتىن قېچىش ، چەكلىمىسىز كۆپەيتىش يوشۇرۇن كۈچى ، ئانگېگېنىزىم ، تاجاۋۇز قىلىش ۋە مېتاستانىزىم ۋە ياللۇغلىنىش.گىلومادا ، بىر نەچچە ئىپادىلەش ئارخىپى تەتقىقاتىدا ئۆزگەرتىلگەن miRNAs ئېنىقلاندى.
ھازىرقى تەتقىقاتتا ، زەھەرلىك چېكىملىك ​​بىلەن يۇقۇملانغان ساھىبجامال ھۈجەيرىلەردە يۇقىرى دەرىجىدىكى miRNA-21 ئىپادىسىنى دەلىللىدۇق.miR-21 قاتتىق ئۆسمىدىكى ئەڭ ھەددىدىن زىيادە بېسىم قىلىنغان مىكرو RNA نىڭ بىرى ئىكەنلىكى ئېنىقلاندى ، بۇنىڭ ئىچىدە گىلوما 33 ياش ، ئۇنىڭ ئىپادىلىنىشى گىلوما دەرىجىسى بىلەن مۇناسىۋەتلىك.توپلانغان پاكىتلار شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، miR-21 رومان ئونكوگېن بولۇپ ، ئۇ گىلوما ئۆسۈشىدە ئاپپتوتىكقا قارشى تۇرۇش رولىنى ئوينايدۇ ھەمدە ئىنسانلارنىڭ مېڭىسىدىكى يامان سۈپەتلىك ئۆسمىنىڭ توقۇلمىلىرى ۋە پلازمىسىدا ھەددىدىن زىيادە بېسىم قىلىدۇ.قىزىقارلىق يېرى ، گىلوما ھۈجەيرىسى ۋە توقۇلمىلاردىكى miR-21 نىڭ ئاكتىپسىزلىنىشى كاسپازغا تايىنىدىغان ئاپتوماتىك داۋالاش سەۋەبىدىن ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىشىنى چەكلەيدۇ.MiR-21 ئالدىن مۆلچەرلەنگەن نىشاننى بىئولوگىيىلىك ئانالىز قىلىش ئارقىلىق ئاپپتوزوز يولى بىلەن مۇناسىۋەتلىك كۆپ خىل ئۆسمىنى بېسىش گېنى ئاشكارىلاندى ، بۇلار پروگرامما ھۈجەيرىسىنىڭ ئۆلۈمى 4 (PDCD4) ، تروپوموسىن (TPM1) ، PTEN ۋە O1 (FoxO1) نى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ..22.38.
FoxO1 ترانسكرىپسىيە ئامىلىنىڭ بىرى (FoxO) بولۇش سۈپىتى بىلەن ، ئىنسانلارنىڭ ھەر خىل راكلىرىنىڭ تەرەققىياتىغا قاتناشقان بولۇپ ، p21 ، p27 ، Bim ۋە FasL40 قاتارلىق ئۆسمىنى بېسىش گېنىنىڭ ئىپادىلىنىشىنى تەڭشىيەلەيدۇ.FoxO1 ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆسۈشىنى تىزگىنلەش ئۈچۈن p27 قاتارلىق ھۈجەيرە ئايلىنىشنى تىزگىنلىگۈچىلەرنى باغلاپ ۋە قوزغىتالايدۇ.ئۇنىڭ ئۈستىگە ، FoxO1 PI3K / Akt سىگنالىنىڭ مۇھىم ئۈنۈمى بولۇپ ، p2742 ترانسكرىپسىيەسىنى قوزغىتىش ئارقىلىق ھۈجەيرە ئايلىنىشى ۋە ھۈجەيرىلەرنى پەرقلەندۈرۈش قاتارلىق نۇرغۇن بىئولوگىيىلىك جەريانلارنى تەڭشەيدۇ.
خۇلاسىلىگەندە ، بىز Toxoplasma ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان مىكرو ئورگانىزىمدىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە miR-21 نىڭ گىلوما ھۈجەيرىسىنىڭ ئۆسۈشىنى تەڭشەش رولىنى ئوينايدىغانلىقىغا ئىشىنىمىز (7-رەسىم).قانداقلا بولمىسۇن ، يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا تەتقىق قىلىپ ، تاشقى ھۈجەيرە miR-21 ، ئۆزگەرتىلگەن زەھەرلىك چېكىملىك ​​بىلەن يۇقۇملىنىش ۋە گىلوما ئۆسۈشى ئوتتۇرىسىدىكى بىۋاسىتە باغلىنىشنى تېپىش كېرەك.بۇ نەتىجىلەرنىڭ زەھەرلىك چېكىملىك ​​بىلەن يۇقۇملىنىش بىلەن گىلوما كېسەللىكىنىڭ مۇناسىۋىتىنى تەتقىق قىلىشنىڭ باشلىنىش نۇقتىسى بىلەن تەمىنلىشىدىن ئۈمىد بار.
بۇ تەتقىقاتتا گىلوما (مېڭە) راك پەيدا قىلىش مىخانىزىمىنىڭ سىخېما دىئاگراممىسى ئوتتۇرىغا قويۇلغان.ئاپتور PowerPoint 2019 (Microsoft, Redmond, WA) دا سىزغان.
بۇ تەتقىقاتتىكى بارلىق تەجرىبە كېلىشىملىرى ھايۋانلارنى ئىشلىتىشنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بولۇپ ، سېئۇل دۆلەتلىك ئۇنىۋېرسىتېت ھايۋاناتلارنى بېقىش ۋە ئىشلەتكۈچى كومىتېتى ئۆلچەملىك ئەخلاق كۆرسەتمىسى بويىچە بولۇپ ، سېئۇل دۆلەتلىك ئۇنىۋېرسىتېت تېببىي ئىنستىتۇتى ئورگان تەكشۈرۈش ھەيئىتى (IRB نومۇرى SNU-) تەرىپىدىن تەستىقلانغان. 150715).-2).بارلىق تەجرىبە تەرتىپلىرى ARRIVE تەۋسىيەسى بويىچە ئېلىپ بېرىلدى.
BV2 چاشقان مىكروبلىرى ۋە U87 ئىنسانلارنىڭ گىلوما ھۈجەيرىسى دۇلبېككونىڭ ئۆزگەرتىلگەن بۈركۈتنىڭ ئوتتۇرا قىسمى (DMEM ؛ ۋېلگېن ، سېئۇل ، كورېيە) ۋە روسۋېل باغچىسى خاتىرە ئىنستىتۇتى ئوتتۇرا (RPMI; Welgene) دا يېتىشتۈرۈلگەن بولۇپ ، ھەر بىرىدە% 10 تۆرەلمە كالا قان زەردابى بار ، 4 mM l- گلۇتامىن ، 0.2 mM پېنىتسىللىن ۋە 0.05 mM سپرېپتومسىن.ھۈجەيرىلەر 37 سېلسىيە گرادۇسلۇق% 5 لىك ئىنكۇباتوردا يېتىشتۈرۈلگەن.U88 ھۈجەيرىسى بىلەن سېلىشتۇرۇشتا يەنە بىر گىلوما ھۈجەيرىسى U118 ئىشلىتىلگەن.
T. gondii ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان RH ۋە ME49 تۈرلىرىدىن ئايرىپ چىقىش ئۈچۈن ، T. gondii tachyzoites (RH strain) 3-4 كۈن بۇرۇن ئوكۇل قىلىنغان 6 ھەپتىلىك BALB / c چاشقاننىڭ قورساق بوشلۇقىدىن يىغىۋېلىندى.تاجىزويىتلار PBS بىلەن ئۈچ قېتىم يۇيۇلۇپ ،% 40 پېركولدا (سىگما-ئالدرىچ ، سانت لۇئىس ، ئامېرىكا MO ، 43) مەركەزدىن قاچۇرۇش ئارقىلىق ساپلاشتۇرۇلدى.ME49 جىددىيلەشتۈرۈلگەن تاجىزوئىتقا ئېرىشىش ئۈچۈن ، BALB / c چاشقانلار ئۆز-ئارا ئوپېراتسىيە قىلىنىپ 20 توقۇلما خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق قورساق بوشلۇقىنى يۇيۇش ئارقىلىق توپلانغان.چاشقانلار PBS بىلەن يۇقۇملانغان.ME49 tachyzoites 100 μg / ml penicillin (Gibco / BRL, Grand Island, NY, USA) ، 100 μg / ml streptomycin (Gibco / BRL) ۋە% 5 تۆرەلمە كالا سۈتى (Lonza, Walkersville, MD) تولۇقلانغان ھۈجەيرىلەردە ئۆستۈرۈلدى. .. ، ئامېرىكا) ° C 37 ۋە% 5 كاربون تۆت ئوكسىد.Vero ھۈجەيرىسىدە يېتىشتۈرۈلگەندىن كېيىن ، ME49 tachyzoites 25 ئۆلچەملىك يىڭنىدىن ئىككى قېتىم ، ئاندىن 5 µm سۈزگۈچ ئارقىلىق ئەخلەت ۋە ھۈجەيرىلەرنى چىقىرىپ تاشلىدى.يۇيۇپ بولغاندىن كېيىن ، تاجىزويىتلار PBS44 دە توختىتىلدى.Toxoplasma gondii نىڭ توقۇلما خالتىلىق ئىششىقى ME49 يۇقۇملانغان C57BL / 6 چاشقاننىڭ مېڭىسىدىن ئايرىۋېتىلگەن خالتىلىق خالتىلىق خالتىلىق ئوكۇل ئارقىلىق ساقلانغان (كورېيە سېئوڭنام شەرق بىيو ھايۋاناتلار مەركىزى)ME49 ۋىرۇسى بىلەن يۇقۇملانغان چاشقانلارنىڭ مېڭىسى 3 ئاي PI دىن كېيىن يىغىۋېلىندى ۋە مىكروسكوپتا مىخلىنىپ خالتىلىق ئىششىقنى ئايرىدى.يۇقۇملانغان چاشقانلار سېئۇل دۆلەتلىك ئۇنىۋېرسىتېت تېببىي ئىنستىتۇتىدا ئالاھىدە كېسەللىك پەيدا قىلغۇچى شارائىتتا ساقلانغان.
ئومۇمىي RNA ئىشلەپچىقارغۇچىلارنىڭ كۆرسەتمىسى بويىچە miVeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, گېرمانىيە) ئارقىلىق BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ھۈجەيرە ، BV2 ھۈجەيرىسى ۋە توقۇلمىلاردىن ئېلىنغان.RNA نىڭ قويۇقلۇقى NanoDrop 2000 سپېكترو فوتومېتىردا بېكىتىلدى.RNA مىكرو ئېلېمېنتلارنىڭ سۈپىتى Agilent 2100 بىيو ئانالىزچىسى (Agilent Technologies, Amstelveen, گوللاندىيە) ئارقىلىق باھالاندى.
% 10 ئېكولوگىيىلىك كەمتۈك FBS بار DMEM ئۇلترا بىنەپشە نۇر ئارقىلىق 100 سېلسىيە گرادۇستا 4 سېلسىيە گرادۇستا 16 سائەت تەييارلانغان ۋە 0.22 µm سۈزگۈچ ئارقىلىق سۈزۈلگەن (ئامېرىكا نالگېن ، روچېستېر ، نيۇ-يورك).BV2 ھۈجەيرىلىرى 5 × 105 بولۇپ ، DMEM دا% 10 ئېكولوگىيىلىك خورىغان FBS ۋە% 1 ئانتىبىئوتىكلار ° C 37 ۋە% 5 CO2 بولغان.24 سائەت يوشۇرۇنغاندىن كېيىن ، ھۈجەيرىلەرگە RH ياكى ME49 (MOI = 10) نىڭ تاجىزويىتلىرى قوشۇلدى ۋە تاجاۋۇز قىلمايدىغان پارازىت قۇرتلار بىر سائەت ئىچىدە ئېلىۋېتىلىپ DMEM بىلەن تولدۇرۇلدى.BV2 ھۈجەيرىسىدىكى Exosomes ئەڭ كۆپ قوللىنىلغان ئۇسۇل ئۆزگەرتىلگەن پەرقلىق مەركەزدىن قاچۇرۇش ئارقىلىق ئايرىۋېتىلدى.RNA ياكى ئاقسىل ئانالىزى ئۈچۈن 300 µl PBS دىكى تاشقى پېلەكنى توختىتىڭ.يەككە ئېكولوگىيىلىك ماددىلارنىڭ قويۇقلۇقى BCA ئاقسىل تەكشۈرۈش ئەسۋابى (پىئېرس ، روكفورد ، IL ، ئامېرىكا) ۋە NanoDrop 2000 سپېكترو فوتومېتىر ئارقىلىق بېكىتىلدى.
BV2 ھۈجەيرىسىدىن ھاسىل بولغان چۆكمە ماددىلار ياكى BV2 دىن ھاسىل بولغان تاشقى ماددىلار PRO-PREP ™ ئاقسىل ئېلىش ئېرىتمىسى (iNtRon بىئوتېخنىكا ، كورېيە سېئوڭنام) دا لايلانغان بولۇپ ، ئاقسىللار Coomassie پارقىراق كۆك رەڭگە% 10 SDS پولىئاكرىلامىد گېلىغا قاچىلانغان.ئۇنىڭدىن باشقا ، ئاقسىل PVDF پەردىسىگە 2 سائەت يۆتكەلدى.غەرب توپى ئالكىس ئانتىتېلاسى (ھۈجەيرە سىگنال تېخنىكىسى ، Beverly ، MA ، ئامېرىكا) نى تاشقى بەلگە قىلىپ دەلىللىدى.HRP بىرىكتۈرۈلگەن ئۆچكە چاشقانغا قارشى IgG (H + L) (Bethyl تەجرىبىخانىسى ، مونتگومېرى ، TX ، ئامېرىكا) ۋە LAS-1000 قوش نۇرلۇق نۇر ئانالىزچىسى (فۇجى فوتوگراف فىلىمى ، توكيو ، ياپونىيە) ئىككىنچى ئانتىتېلا سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن..ئېلېكترونلۇق مىكروسكوپ ئېكولوگىيىلىك ماددىلارنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى ۋە مورفولوگىيىسىنى تەتقىق قىلىش ئۈچۈن ئېلىپ بېرىلدى.BV2 ھۈجەيرىسىدىن ئايرىۋېتىلگەن Exosomes (6.40 µg / µl) كاربون بىلەن قاپلانغان مەشلەردە تەييارلىنىپ ،% 2 لىك ئۇران ئاتسېتات بىلەن مەنپىي بويالغان.تەييارلانغان ئەۋرىشكەلەر ES1000W Erlangshen CCD كامېراسى (Gatan, Pleasanton, CA, ئامېرىكا) سەپلەنگەن JEOL 1200-EX II (توكيو ، ياپونىيە) ئارقىلىق 80 كىلوۋولتلۇق تېزلىنىش بېسىمىدا تەكشۈرۈلگەن.
BV2 دىن ھاسىل بولغان ئېكولوگىيىلىك ماددىلار PKH26 قىزىل فلۇئورېسسېنېر ئۇلىنىش زاپچىسى (ئامېرىكا سىگما-ئالدرىچ ، سانت لۇئىس ، MO ، ئامېرىكا) ئارقىلىق ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 15 مىنۇت بويالغان.U87 ھۈجەيرىسى ، 2 × 105 ، PKH26 ماركىلىق ئېكولوگىيىلىك (قىزىل) ياكى مەنپىي كونترول قىلىنمىغان تاشقى ھۈجەيرە يوق ،% 5 لىك CO2 ئىنكۇباتوردا 37 سېلسىيە گرادۇستا 24 سائەت سىلىندى.U87 ھۈجەيرە يادروسى DAPI (كۆك) بىلەن بويالغان ، U87 ھۈجەيرىلىرى% 4 لىك پارافورمالدېگىدتا 15 سېلسىيە گرادۇستا 15 مىنۇت تۇرغۇزۇلغان ، ئاندىن لېيكا TCS SP8 STED CW ئارىلاشما مىكروسكوپ سىستېمىسىدا ئانالىز قىلىنغان (Leica Microsystems, Mannheim, Germany).كۆزىتىشكە بولىدۇ.
cDNA siRNA دىن Mir-X siRNA تۇنجى تال بىرىكمە بىرىكتۈرۈش ۋە SYBR qRT-PCR يۈرۈشلۈك زاپچاسلىرى ئارقىلىق بىرىكتۈرۈلگەن (Takara Bio Inc. ، ياپونىيە شىگا).ھەقىقىي ۋاقىت مىقدارلاشقان PCR iQ5 ھەقىقىي ۋاقىت PCR بايقاش سىستېمىسى (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) ئارقىلىق SYBR Premix ئارىلاشتۇرۇلغان دەسلەپكى ۋە قېلىپلارنى ئىشلىتىپ ئېلىپ بېرىلدى.DNA 40 سېلسىيە گرادۇسلۇق 95 سېلسىيە گرادۇس 15 سېلسىيە گرادۇس ، 60 سېلسىيە گرادۇس 60 سېلسىيە گرادۇسلۇق يۇقىرى كۆتۈرۈلدى.ھەر بىر PCR ئىنكاسىدىكى سانلىق مەلۇماتلار iQ ™ 5 ئوپتىكىلىق سىستېما يۇمشاق دېتالى (Bio-Rad) نىڭ سانلىق مەلۇمات ئانالىز مودۇلى ئارقىلىق تەھلىل قىلىنغان.تاللانغان نىشانلىق گېن بىلەن act- ئاتىن / siRNA (ۋە U6) ئارىسىدىكى گېن ئىپادىلىنىشىدىكى نىسپىي ئۆزگىرىشلەر ئۆلچەملىك ئەگرى ئۇسۇل ئارقىلىق ھېسابلىنىدۇ.ئىشلىتىلگەن دەسلەپكى تەرتىپلەر 1-جەدۋەلدە كۆرسىتىلدى.
3 x 104 U87 گىلوما ھۈجەيرىسى 96 قۇدۇق تەخسىگە ئۇرۇق سېلىنىپ ، BV2 (50 mg / mL) ياكى BV2 (50 μ mg / mL) دىن ھاسىل بولغان تومۇردىن ياسالغان زەھەرلىك ماددىلار بىلەن 12 ، 18 ۋە 36 سائەتتە كونترول قىلىندى. .ھۈجەيرىلەرنىڭ كۆپىيىش نىسبىتى ھۈجەيرە ھېسابلاش Kit-8 (دوجىندو ، كۇماموتو ، ياپونىيە) (قوشۇمچە رەسىملەر S1-S3) 46 ئارقىلىق بېكىتىلدى.
5 ھەپتىلىك ئايال BALB / c يالىڭاچ چاشقانلار شەرق بىيو (كورىيەنىڭ Seongnam-si) دىن سېتىۋېلىنىپ ، ئۆي تېمپېراتۇرىسى (22 ± 2 سېلسىيە گرادۇس) ۋە نەملىك (45 ± 15 سېلسىيە گرادۇس) لاردا ئايرىم قەپەسلەردە ساقلاندى.%) ئۆي تېمپېراتۇرىسى (22 ± 2 ° C) ۋە نەملىك (45 ± 15%).SPF (سېئۇل دۆلەتلىك ئۇنىۋېرسىتېت تېببىي ئىنستىتۇتى ھايۋاناتلار مەركىزى) ئاستىدا 12 سائەتلىك يورۇقلۇق دەۋرى ۋە 12 سائەتلىك قاراڭغۇ ئايلىنىش ئېلىپ بېرىلدى.چاشقانلار ئىختىيارىي ھالدا 5 گۇرۇپپىدىن تەركىب تاپقان ئۈچ گۇرۇپپىغا بۆلۈنگەن بولۇپ ، بارلىق گۇرۇپپىلار 400 مىللىمېتىر PBS بىلەن تېرە ئاستىغا ئوكۇل قىلىنغان ، تەركىبىدە 1 x 107 U87 گىلوما ھۈجەيرىسى بار بولۇپ ، ئۆسۈش ئامىلى BD Matrigel reduced نى ئازايتقان (BD Science, Miami, FL, USA).ئۆسمە ئوكۇل قىلىنىپ ئالتە كۈندىن كېيىن ، BV2 ھۈجەيرىسىدىن ھاسىل بولغان 200 مىللىگىرام تاشقى ھۈجەيرە ئۆسمىسى (زەھەرلىك چېكىملىك ​​بىلەن يۇقۇملانمىغان) ئۆسمە ئورنىغا ئوكۇل قىلىندى.ئۆسمە يۇقۇملىنىپ 22 كۈندىن كېيىن ، ھەر گۇرۇپپىدىكى چاشقانلارنىڭ ئۆسمىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى ھەپتىدە ئۈچ قېتىم كالپۇك بىلەن ئۆلچەنگەن ، ئۆسمىنىڭ مىقدارى 0.5 × (كەڭلىك) × 2 × ئۇزۇنلۇقتىكى فورمۇلا ئارقىلىق ھېسابلىنىدۇ.
MiRCURYTM LNA miRNA گۇرۇپپىسىنى ئىشلىتىپ MicroRNA ئىپادىلەش ئانالىزى ، 7-ئەۋلاد ، mmu ۋە rno سانلار گۇرپىسى (EXIQON, Vedbaek, دانىيە) 3100 ئادەم ، چاشقان ۋە چاشقان miRNA نى تەكشۈرۈش ئەسۋابى ئارىسىدا 1119 ياخشى خاراكتېردىكى چاشقاننى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.بۇ جەرياندا موزاينىڭ ئۈچەيدىكى ئىشقارلىق فوسفاتازا بىلەن داۋالاش ئارقىلىق Hy3 يېشىل فلۇئورېسسېن بوياق بىلەن ماركا چاپلاش ئارقىلىق ، ئومۇمىي RNA نىڭ 250 دىن 1000 ng غىچە 5 ′ فوسفاتتىن چىقىرىۋېتىلدى.ئاندىن بەلگە قويۇلغان ئەۋرىشكەلەر ئارىلاشما كامېرا زاپچاسلىرى (Agilent Technologies ، سانتا كلارا ، ئامېرىكا ، CA) ۋە ئارىلاش ماتورلۇق تام تەسۋىر زاپچاسلىرى (Agilent Technologies) ئارقىلىق مىكرو شار تام تەسۋىرنى يۈكلەش ئارقىلىق بىرلەشتۈرۈلگەن.بىرىكتۈرۈش 16 سېلسىيە گرادۇستا 16 سائەت ئېلىپ بېرىلدى ، ئاندىن ئىشلەپچىقارغۇچىلارنىڭ تەۋسىيەسى بويىچە مىكرو ئېلېمېنتلار يۇيۇلدى.ئاندىن پىششىقلاپ ئىشلەنگەن مىكرو تىپتىكى تام تەسۋىر Agilent G2565CA مىكرو تىپلىق سىكانېرلاش سىستېمىسى (Agilent Technologies) ئارقىلىق سايىلىدى.سىكانىرلانغان رەسىملەر Agilent ئىقتىدار چىقىرىش يۇمشاق دېتالىنىڭ 10.7.3.1 نەشرى (Agilent Technologies) ئارقىلىق ئىمپورت قىلىنغان بولۇپ ، ئۆزگەرتىلگەن Exiqon كېلىشىمىنىڭ ماس كېلىدىغان GAL ھۆججىتى ئارقىلىق ھەر بىر رەسىمنىڭ فلۇئورېسسېنسىيە كۈچلۈكلىكى مىقدارلاشقان.نۆۋەتتىكى تەتقىقاتتىكى Microarray سانلىق مەلۇماتلىرى GEO سانلىق مەلۇمات ئامبىرىغا GPL32397 غا قويۇلغان.
Toxoplasma بىلەن يۇقۇملانغان RH ياكى ME49 تىپلىق مىكرو تىپلىق پىشىپ يېتىلگەن تاشقى miRNAs نىڭ ئىپادىلەش ئارخىپى ھەر خىل تور قوراللىرى ئارقىلىق تەھلىل قىلىنغان.ئۆسمىنىڭ يېتىلىشىگە مۇناسىۋەتلىك miRNAs miRWalk2.0 (http://mirwalk.umm.uni-heidelberg.de) ئارقىلىق ئېنىقلانغان ۋە سىگنالنىڭ كۈچلۈكلۈكى (log2) بىلەن 8.0 دىن يۇقىرى سۈزۈلگەن.MiRNAs ئىچىدە ، ئوخشىمىغان ئىپادىلەنگەن miRNAs نىڭ T. gondii بىلەن يۇقۇملانغان RH ياكى ME49 تىپلىرى تەرىپىدىن ئۆزگەرتىلگەن miRNAs نى سۈزۈش ئانالىزى ئارقىلىق 1.5 ھەسسىدىن كۆپرەك ئۆزگەرتىلگەنلىكى بايقالدى.
ھۈجەيرىلەر Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, US) ئارقىلىق ئوپتى- MEM (Gibco, Carlsbad, CA, USA) دىكى ئالتە قۇدۇق تەخسىگە (3 x 105 ھۈجەيرە / قۇدۇق) ئۇرۇقلانغان.ئۇلانغان ھۈجەيرىلەر 6 سائەت مەدەنىيەتلەشتۈرۈلگەندىن كېيىن ، ۋاسىتە يېڭى تولۇق ھالەتكە ئۆزگەرتىلگەن.ھۈجەيرىلەر 24 سائەتتىن كېيىن يىغىۋېلىندى.
ستاتىستىكىلىق ئانالىز ئاساسلىقى Excel يۇمشاق دېتالى (مىكروسوفت ، ۋاشىنگتون ، ئامېرىكا) بىلەن ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقىدىن پايدىلىنىپ ئېلىپ بېرىلدى.تەجرىبە ھايۋانلارنى ئانالىز قىلىش ئۈچۈن ، Prism 3.0 يۇمشاق دېتالى (GraphPad يۇمشاق دېتالى ، لا جوللا ، ئامېرىكا ، CA) دىن ئىبارەت قوش يۆنىلىشلىك ANOVA ئېلىپ بېرىلدى. P- قىممىتى <0.05 ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتكە ئىگە دەپ قارالدى. P- قىممىتى <0.05 ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتكە ئىگە دەپ قارالدى. Значения P <0,05 считались статистически значимыми. P قىممىتى <0.05 ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتلىك دەپ قارالدى. P 值 <0.05 被 认为 具有 统计学 意义。 P 值 <0.05 Значения P <0,05 считались статистически значимыми. P قىممىتى <0.05 ستاتىستىكىلىق ئەھمىيەتلىك دەپ قارالدى.
بۇ تەتقىقاتتا ئىشلىتىلگەن بارلىق تەجرىبە كېلىشىملىرى سېئۇل دۆلەتلىك ئۇنىۋېرسىتېت تېببىي ئىنستىتۇتى ئورگان تەكشۈرۈش ھەيئىتى (IRB نومۇرى SNU-150715-2) تەرىپىدىن تەستىقلاندى.
The data used in this study are available upon reasonable request from the first author (BK Jung; mulddang@snu.ac.kr). And the microarray data for the current study is deposited in the GEO database under registration number GPL32397.
Furley, J. et al.2018-يىلى يەر شارى راك كېسەللىكى ۋە ئۆلۈش نىسبىتى: GLOBOCAN مەنبەسى ۋە ئۇسۇلى.ئىزاھلاش.J. Ruck 144 ، 1941–1953 (2019).
Rasheed, S., Rehman, K. & Akash, MS مېڭە ئۆسمىسىنىڭ خەتەرلىك ئامىللىرى ۋە ئۇلارنىڭ داۋالاشقا ئارىلىشىشى توغرىسىدىكى چۈشەنچە. Rasheed, S., Rehman, K. & Akash, MS مېڭە ئۆسمىسىنىڭ خەتەرلىك ئامىللىرى ۋە ئۇلارنىڭ داۋالاشقا ئارىلىشىشى توغرىسىدىكى چۈشەنچە.راشىد ، س. ، رېخمان ، ك ۋە ئاكاش ، MS مېڭە ئۆسمىسى ۋە ئاساسلىق داۋالاشقا ئارىلىشىشتىكى خەتەرلىك ئامىللارنى تەكشۈرۈش. Rasheed, S., Rehman, K. & Akash, MS 深入 了解 脑 肿瘤 的 危险 因素 及其 治疗 干预 措施。 Rasheed, S., Rehman, K. & Akash, MS مېڭە ئۆسمىسىنىڭ خەتەرلىك ئامىللىرى ۋە داۋالاشنىڭ ئارىلىشىشىنى چوڭقۇر چۈشىنىش.راشىد ، س. ، رېخمان ، ك ۋە ئاكاش ، MS مېڭە ئۆسمىسى ۋە ئاساسلىق داۋالاشقا ئارىلىشىشتىكى خەتەرلىك ئامىللارنى تەكشۈرۈش.بىيولوگىيەلىك ئىلىم.دورىگەر.143 ، 112119 (2021).
كاتو ، I. ، جاڭ ، ج. ۋە سۈن ، ج. باكتېرىيە ۋە ۋىرۇسنىڭ ئىنسانلارنىڭ جىنسىي يول ۋە ئاياللار جىنسىي يولى راكىدىكى ئۆز-ئارا تەسىر قىلىشى: تارقىلىشچان كېسەللىكلەر ۋە تەجرىبىخانىلارنىڭ ئىسپاتى. كاتو ، I. ، جاڭ ، ج. ۋە سۈن ، ج. باكتېرىيە ۋە ۋىرۇسنىڭ ئىنسانلارنىڭ جىنسىي يول ۋە ئاياللار جىنسىي يولى راكىدىكى ئۆز-ئارا تەسىر قىلىشى: تارقىلىشچان كېسەللىكلەر ۋە تەجرىبىخانىلارنىڭ ئىسپاتى.كاتو I. ، جاڭ ج ۋە سۈن ج. ئىنسانلارنىڭ ئاشقازان-ئۈچەي يولى ۋە ئاياللار جىنسىي يولى راكىدىكى باكتېرىيە بىلەن ۋىرۇسنىڭ ئۆز-ئارا تەسىر قىلىشى: تارقىلىشچان كېسەللىكلەر ۋە تەجرىبىخانا سانلىق مەلۇماتلىرىنىڭ خۇلاسىسى. Kato, I., Zhang, J. & Sun, J. 人类 口腔 消化道 癌 和 女性 细菌 细菌 - 病毒 相互作用 ： 流行病学 病毒 实验室 证据。。 Kato, I., جاڭ, J. & Sun, J. باكتېرىئو-ۋىرۇسنىڭ ئىنسانلارنىڭ ئېغىز بوشلۇقى ھەزىم قىلىشى ۋە ئاياللارنىڭ كۆپىيىش يولىدىكى ئۆز-ئارا تەسىر قىلىشى: ئاممىباب كېسەللىك ئىلمى ۋە تەجرىبىخانا ئىسپاتى.كاتو I. ، جاڭ ج ۋە سۈن ج. ئىنسانلارنىڭ ئاشقازان-ئۈچەي راكى ۋە ئاياللار جىنسىي راكىدىكى باكتېرىيە بىلەن ۋىرۇسنىڭ ئۆز-ئارا تەسىر قىلىشى: تارقىلىشچان كېسەللىكلەر ۋە تەجرىبىخانا سانلىق مەلۇماتلىرىنىڭ خۇلاسىسى.راك 14 ، 425 (2022).
ماگون ، KL & Parish, JL يۇقۇملىنىشتىن راكقىچە: DNA ئۆسمە ۋىرۇسى ساھىبجامال مەركىزى كاربون ۋە ياغنىڭ مېتابولىزمىنى قانداق ئۆزگەرتىدۇ. ماگون ، KL & Parish, JL يۇقۇملىنىشتىن راكقىچە: DNA ئۆسمە ۋىرۇسى ساھىبجامال مەركىزى كاربون ۋە ياغنىڭ مېتابولىزمىنى قانداق ئۆزگەرتىدۇ.ماھون ، KL ۋە Parish ، JL ئوت ئاپىتىنىڭ راكقا يۇقۇملىنىشى: DNA نى ئاساس قىلغان ئۆسمە ۋىرۇسلىرى ساھىبجامال مەركىزى كاربون ۋە ياغنىڭ مېتابولىزمىنى قانداق ئۆزگەرتىدۇ. Magon, KL & Parish, JL 从 感染 到 癌症 ： DNA 肿瘤 病毒 如何 改变 宿主 细胞 的 中心 碳 和 脂质。。 ماگون ، KL & Parish, JL يۇقۇملىنىشتىن راكقىچە: DNA ئۆسمىسى ۋىرۇسى ساھىبجامال مەركىزى كاربون ۋە ياغنىڭ مېتابولىزمىنى قانداق ئۆزگەرتىدۇ.Mahon, KL and Parish, JL Fires راكقا يۇقۇملىنىش: DNA ئۆسمە ۋىرۇسلىرىنىڭ ساھىبخان ھۈجەيرىلەردە مەركىزى كاربون ۋە ياغنىڭ مېتابولىزمىنى قانداق ئۆزگەرتىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.ئوچۇق بىئولوگىيە.11, 210004 (2021).
Correia da Costa, JM قاتارلىقلار.كاتېخول ئېستروگېن سىستوزوم ۋە جىگەر ياللۇغى ۋە گېلىنغا مۇناسىۋەتلىك راك.ئالدى.hot hot.5, 444 (2014).