گىئارديا ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغى بىر خىل پارازىت قۇرت بولۇپ ، ئۈچەيدە يۇقۇملىنىش ، كىچىك بالىلاردا ئىچ سۈرۈشنىڭ كلىنىكىلىق ئالامەتلىرى بار.بىز ئىلگىرى تاشقى ھۈجەيرە G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ ھۈجەيرە ئىچىدىكى ئولىگومېرلىشىشقا ئوخشاش قوبۇللىغۇچ 3 (NLRP3) بىرىكتۈرگۈچى يادرونىڭ ئاكتىپلىنىشىنى قوزغايدىغانلىقىنى ۋە ھۈجەيرە سىرتىدىكى تومۇر (EV) ئاجرىتىپ چىقىرىش ئارقىلىق ساھىبجامالنىڭ ياللۇغ قايتۇرۇشنى تەڭشەيدىغانلىقىنى خەۋەر قىلغان ئىدۇق.قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ جەريانغا قاتناشقان كېسەللىك قوزغاتقۇچ بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئون ئىككى بارماق ئۈچەي تاياقچە باكتېرىيەسى EV (GEV) نىڭ ئېنىق مولېكۇلا ئەندىزىسى ۋە NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ گىئارد كېسەللىكىدىكى رولى تېخى ئېنىقلانمىدى.
قايتا ھاسىل بولىدىغان ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش پلازمىسى pcDNA3.1 (+) - GEV دىكى ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىئارددىن ياسالغان ، چاشقاننىڭ دەسلەپكى ئەتراپىدىكى ماكرو پەردىسىگە ئالماشتۇرۇلغان ۋە ياللۇغلىنىش نىشانى مولېكۇلا كاسپازا -1 نى ئۆلچەش ئارقىلىق بايقالغان.P20 ئىپادىلەش دەرىجىسى تەكشۈرۈلدى..G. duodenalis alpha-2 ۋە alpha-7.3 گىگانتلىرى ئەسلىدە NLRP3 ياللۇغى (NLRP3 ، pro-interleukin-1 beta [IL-1β] ، كاسپازا -1 ۋە كاسپازا -1 p20) ، IL ئاجرىتىپ چىقىرىش ئارقىلىق ئېنىقلانغان.1β سەۋىيىسى ، ئاپتوماتىك داغلانغان ئاقسىل (ASC) ئولىگومېرلىشىش دەرىجىسى ۋە NLRP3 ۋە ASC نىڭ ئىممۇنىتېت كۈچىنىڭ يەرلىكلىشىشى.NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ كېسەللىك پەيدا قىلىشتىكى رولى ئاندىن NLRP3 ئاكتىپلاش توسقۇنلۇققا ئۇچرىغان چاشقانلار ئارقىلىق باھالانغان ۋە بەدەن ئېغىرلىقىدىكى كېسەللىك ئۆزگىرىشى ، ئون ئىككى بارماق پارازىت يۈكى ۋە ئون ئىككى بارماق ئۈچەي توقۇلمىلىرى تەكشۈرۈلگەن.ئۇنىڭدىن باشقا ، بىز ئالفا -2 ۋە ئالفا -3،3 نىڭ NLRP3 ياللۇغلىنىش ئارقىلىق vivo دا IL-1β ئاجرىتىپ چىقىرىشنى پەيدا قىلغان-قىلمىغانلىقىنى تەكشۈرۈپ ، بۇ مولېكۇلالارنىڭ چاشقاندىكى G. ئون ئىككى بارماقنىڭ كېسەللىك پەيدا قىلىشتىكى رولىنى ئېنىقلىدۇق.
ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىگانتلىرى ۋىرۇستا NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ قوزغىلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.بۇنىڭ بىلەن p20 كاسپازا -1 نىڭ قوزغىتىلىشى ، NLRP3 ، IL-1β ۋە كاسپازا -1 ئاقسىلىنىڭ ئىپادىلىنىش دەرىجىسىنىڭ ئۆسۈشى ، IL-1β ئاجرىلىپ چىقىشىنىڭ كۆرۈنەرلىك ئېشىشى ، ASA دا داغلارنىڭ شەكىللىنىشىگە سەۋەب بولدى. سىتوپلازما ۋە ASA ئولىگومېرلىشىشنىڭ پەيدا بولۇشى.NLRP3 ياللۇغلىنىش زەكەرنىڭ يوقىلىشى چاشقاندىكى G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ كېسەللىك قوزغىلىشىنى ئېغىرلاشتۇرۇۋېتىدۇ.چاشقانلار NLRP3 توسۇلۇپ قالغان چاشقانلارنىڭ خالتىلىق ئىششىقى بىلەن داۋالانغان چاشقانلار تروپوزوئىتنىڭ كۆپىيىپ ، ئون ئىككى بارماق ئۈچەيگە ئېغىر بۇزغۇنچىلىق قىلغانلىقىنى كۆرسەتتى ، بۇ خىل كىچىك شارچە شاخلىرى كىچىكلەپ شاخلىنىدۇ.Vivo تەجرىبىسىدە ئىسپاتلىنىشىچە ، گىئاردېن ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 NLRP3 ياللۇغى ئارقىلىق IL-1β نىڭ ئاجرىلىپ چىقىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىكەن ، ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېن بىلەن ئىممۇنىتېتلاش چاشقاندىكى G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ كېسەللىك پەيدا قىلىش نىسبىتىنى تۆۋەنلىتىدىكەن.
ئومۇملاشتۇرغاندا ، بۇ تەتقىقات نەتىجىسى گىئارديا ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 ساھىبجامال NLRP3 ياللۇغنىڭ تەڭشىلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىپ ، چاشقاندىكى G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ يۇقۇملىنىشىنى ئازايتىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.
گىئارديا ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ھۈجەيرىسى تاشقى ھۈجەيرە پەردىسى بولۇپ ، كىچىك ئۈچەيدە ياشايدۇ ۋە ھەر يىلى 280 مىليون دانىخورەك كېسىلىگە گىرىپتار بولىدۇ ، بولۇپمۇ تەرەققىي قىلىۋاتقان دۆلەتلەردىكى كىچىك بالىلار [1].كىشىلەر ماكۇدېنوبۇم كارتىسى بىلەن يۇقۇملانغان سۇ ياكى يېمەكلىكلەر بىلەن يۇقۇملانغان, ئاندىن ئاشقازانغا كىرىدۇ, ئاندىن ئاشقازانغا كىرىدۇ ھەمدە ئاشقازانلىق شەربەتكە چىقىدۇ.گىئارديا ئون ئىككى بارماق ئۈچەي تاياقچە باكتېرىيەسى ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىغا چاپلىشىپ ، كۆڭلى ئاينىش ، قۇسۇش ، ئىچ سۈرۈش ، قورساق ئاغرىش ۋە ئورۇقلاشنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.ئىممۇنىتېت كەمتۈكلىكى ۋە خالتىلىق ئىششىق كېسىلىگە گىرىپتار بولغانلار ئاسانلا يۇقۇملىنىدۇ.ئېغىز ۋە ئېغىز بوشلۇقى ئارقىلىق يۇقۇملىنىشمۇ كۆرۈلىدۇ [2].مېترونىدازول ، تىنىدازول ۋە نىتازوسانىد قاتارلىق دورىلار ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىنىڭ ئەڭ ياخشى داۋالاش ئۇسۇلى [3].قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ خىمىيىلىك داۋالاش دورىلىرى كۆڭلى ئاينىش ، راك پەيدا قىلىش ۋە گېننىڭ زەھەرلىنىشى قاتارلىق ناچار تەسىرلەرنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ [4].شۇڭلاشقا ، G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىنىڭ ئالدىنى ئېلىش ئۈچۈن تېخىمۇ ئۈنۈملۈك ئىستراتېگىيىلەرنى تۈزۈشكە توغرا كېلىدۇ.
ياللۇغلىنىش تۇغما ئىممۇنىتېت ئىنكاسىنىڭ بىر قىسمى بولغان سىتوسوللىق ئاقسىلنىڭ بىر تۈرى بولۇپ ، كېسەللىك قوزغاتقۇچىنىڭ تاجاۋۇزىدىن مۇداپىئەلىنىش ۋە ياللۇغ قايتۇرۇش ۋاسىتىلىرىنى مۇرەسسە قىلىشقا ياردەم بېرىدۇ [5].بۇ خىل ياللۇغلىنىش ئىچىدە ، يادرونى باغلاش ئولىگومېرلىشىش (NOD) قوبۇل قىلغۇچى 3 (NLRP3) يادرونى باغلاش ئولىگومېرلىشىش (NLRP3) يادرونى باغلاشتەك ياللۇغلىنىش كەڭ كۆلەمدە تەتقىق قىلىنغان ، چۈنكى ئۇ ھەر خىل كېسەللىك قوزغاتقۇچى / زىيانغا مۇناسىۋەتلىك مولېكۇلا ئەندىزىسى (PAMP / DAMP) ، تۇغما ئىممۇنىتېت سىستېمىسىنى تونۇيدۇ ، قوزغىتىدۇ.ھەمدە نۇرغۇن ياللۇغلىنىش كېسەللىكلىرىدىكى ئۈچەيدىكى قان تومۇرنى تەڭشەيدۇ [6,7,8].ئۇ ئەندىزە پەرقلەندۈرۈش قوبۇللىغۇچىسى (PRR) NLRP3 ، ماسلاشتۇرغۇچ ئاپتوماتىك داغلانغان ئاقسىل (ASC) ۋە ئېففېكتور پروپاسپاس -1 ياكى پروپاسپاس -11 دىن تەركىب تاپقان.NLRP3 ياللۇغلىنىش كېسەللىك قوزغاتقۇچىنىڭ تاجاۋۇزىغا قارشى ساھىبخانلىق رولىنى ئوينايدۇ ، Neospora كانىيىدا [9] ، Paracoccidioides brasiliensis [10] ۋە لېيشمانىيە تەتقىقاتىدا.[11] ، ئەمما يەنە مەلۇم بولۇشىچە ، NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ قوزغىتىلىشى قوغدىنىش ئىممۇنىتېت ئىنكاسىنى چەكلەپ ، كېسەللىكنىڭ ئىلگىرىلىشىنى ئېغىرلاشتۇرۇۋېتىدۇ ، مەسىلەن ، قۇرتلاردا [12].بىز ئىلگىرىكى بايقاشلىرىمىزغا ئاساسەن ، تاشقى ھۈجەيرە G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ NLRP3 ياللۇغنىڭ ھۈجەيرە ئىچىدىكى ئاكتىپچانلىقىنى قوزغايدىغانلىقىنى ۋە ھۈجەيرە سىرتىدىكى تومۇر (EV) نى ئاجرىتىپ ساھىبجامالنىڭ ياللۇغلىنىش ئىنكاسىنى تەڭشەيدىغانلىقىنى خەۋەر قىلدۇق.قانداقلا بولمىسۇن ، NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىنىڭ vivo دىكى رولى تېخى ئېنىقلانمىدى.
گىئاردېنس ئەسلىدە G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي تاياقچە باكتېرىيىسىنىڭ قۇرۇلما تەركىبلىرى دەپ تەسۋىرلەنگەن بولۇپ ، كىچىك ئۈچەيدىكى تروفوزوئىتنىڭ ھەرىكەتلىنىشى ۋە ئېپىتېلىيە ھۈجەيرىسىنىڭ باغلىنىشىدا مۇھىم رول ئوينايدۇ.مۇھىتقا تېخىمۇ ياخشى ماسلىشىش ۋە ئۇلارنىڭ كېسەللىك قوزغىلىشچانلىقىنى ئاشۇرۇش ئۈچۈن ، G. duodenalis trophozoites 8 بايراق ، 1 ئوتتۇرا گەۋدە ۋە 1 شامالدارىش دىسكىسىدىن تەركىب تاپقان ئۆزگىچە سىتوسېلكېل قۇرۇلمىسىنى بارلىققا كەلتۈردى [14].گىئارديا ئون ئىككى بارماق ئۈچەي تاياقچە باكتېرىيىسى سىتوسكېلېتون ئارقىلىق ئۈستۈنكى كىچىك ئۈچەيگە ، بولۇپمۇ ئون ئىككى بارماق ئۈچەيگە سىڭىپ كىرىدۇ ۋە بالىياتقۇ ئىچكى پەردىسىگە تۇتىشىدۇ.ئۇلار توختىماي كۆچۈپ ، ھۈجەيرە مېتابولىزمى ئارقىلىق ئېپىتېلىيە ھۈجەيرىسىگە چاپلىنىدۇ.شۇڭلاشقا ، ئۇلارنىڭ سىتوسكېلېتون بىلەن ۋىرۇسنىڭ قويۇق مۇناسىۋىتى بار.Giardia ئون ئىككى بارماق ئۈچەيگە خاس بولغان گىئاردېن سىتوسكېلېتون قۇرۇلمىسىنىڭ تەركىبىي قىسمى [15] بولۇپ ، α- ، β- ، γ- ۋە δ-giardines دىن ئىبارەت تۆت تۈرگە ئايرىلىدۇ.Gi- گىئاردېن جەمەتىنىڭ 21 ئەزاسى بار ، ئۇلارنىڭ ھەممىسىنىڭ فوسفولىدنى باغلاشتا كالتسىيغا تايىنىش ئىقتىدارى بار [16].ئۇلار يەنە سىتوسكېلېتوننى ھۈجەيرە پەردىسىگە ئۇلايدۇ.G. duodenalis كەلتۈرۈپ چىقارغان ئىچ سۈرۈش كېسىلىگە گىرىپتار بولغانلاردا ، α- گىئارددىن يۇقۇملىنىش جەريانىدا ئىپادىلىنىدۇ ۋە ئىممۇنىتېت كۈچى تۆۋەنلەيدۇ [17].گىئارديا ئالفا -1 نى ئاساس قىلغان گېروولوگىيىلىك ۋاكسىنىلار چاشقانلاردىكى يۈرەك مۇسكۇلى ياللۇغىدىن ساقلىنىدۇ ۋە ۋاكسىنىنىڭ تەرەققىي قىلىشىدىكى كاندىدات ئانتىگېندۇر [18].ئالفا -8 گىئارددىن پلازما پەردىسى ۋە بايراقدارىدا يەرلىكلەشتۈرۈلگەن ، ئەمما شامالدارىش دىسكىسىغا تەۋە ئەمەس ، G. duodenalis دىكى تروفوزوئىتنىڭ ھەرىكەتچانلىقى ۋە ئۆسۈش سۈرئىتىنى ئاشۇرىدۇ [19].ئالفا -14 گىئارددىن بايراقتىكى مىكرو قۇتۇب قۇرۇلمىسىنى چاپلاپ ، G. duodenalis نىڭ ھاياتىي كۈچىگە تەسىر كۆرسىتىدۇ.ئالفا -11 گىئاردېن ھاياتلىق دەۋرىدە ناھايىتى كۆپ بولۇپ ، ئالفا -11 گىئاردېننىڭ ھەددىدىن زىيادە بېسىم قىلىشى G. duodenalis نىڭ ئۆزىگە زىيان سالىدۇ [21].قانداقلا بولمىسۇن ، ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېننىڭ G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغى ۋە ئۇلارنىڭ ئاساسىي مېخانىزىمىدىن مۇداپىئەلىنەلەيدىغانلىقى ئېنىق ئەمەس.
بۇ تەتقىقاتتا ، قايتا ھاسىل بولىدىغان ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش پلازمىسى pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 گىئاردېن ۋە pcDNA3.1 (+) - ئالفا -7.ئاندىن ياللۇغلانغان نىشانلار تەكشۈرۈلدى.بىز يەنە NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ كېسەللىك پەيدا قىلىشتىكى رولىنى باھالىدۇق ، ئالفا -2 ۋە ئالفا -3،3 گىگانت ماددىسىنىڭ vivo دىكى NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ قوزغىلىش-قوزغالمىغانلىقىنى تەكشۈردۇق ۋە گىگانتلارنىڭ بۇ ئىككى خىل رولى بارلىقىنى ئېنىقلىدۇق. G. duodenalis.بىزنىڭ ئورتاق مەقسىتىمىز G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىنىڭ ئالدىنى ئېلىشتىكى ئۈمىدۋار نىشانلارنى تەرەققىي قىلدۇرۇش.
ياۋا تىپتىكى (WT) C57BL / 6 ~ 8 ھەپتىلىك ئايال چاشقان لياۋنىڭ چاڭشېڭ تەجرىبە ھايۋاناتلار مەركىزىدىن (جۇڭگو لياۋنىڭ) سېتىۋېلىندى.چاشقانلار سۇدىن ھەقسىز بەھرىمەن بولغان ، مىكروبسىزلاندۇرۇلغان يېمەكلىكلەرنى قوبۇل قىلغان ۋە 12/12 سائەتلىك يورۇقلۇق / قاراڭغۇلۇق دەۋرىدە ساقلانغان.چاشقانلار يۇقۇملىنىشتىن ئىلگىرى ، ئامپىسلىن (1 mg / mL) ، ۋانكومىنسىن (1 mg / mL) ۋە نېئومىيسىن (1.4 mg / mL) تولۇقلانغان ئىچىملىك ​​سۇدا ئانتىبىئوتىكلارنىڭ ئېلان ئەركىنلىكىنى تاپشۇرۇۋالغان. ].].24 سائەت يېيىش ۋە ئىچىش ئىقتىدارىنى يوقاتقان ۋە بەدەن ئېغىرلىقى% 20 تۆۋەنلىگەن چاشقانلار بالىياتقۇ بوينىنىڭ يۆتكىلىشى بىلەن ئىنسانلار تەرىپىدىن ئېتىۋېتىلگەن.
WB G. duodenalis trophozoites (ئامېرىكا تىپىدىكى مەدەنىيەت توپلىمى ، ئامېرىكا ماناسسا ، ئامېرىكا)% 12.5 تۆرەلمە كالا قان زەردابى (FBS; جۇڭگونىڭ ھەر بىر يېشىل ، جېجياڭ) ۋە% 0.1 كالا ئۆت سۇيۇقلۇقى (سىگما-ئالدرىچ ، سانت مىسسۇرى ، ئامېرىكا ).ئامېرىكا) مىكرو ئورگانىزم شارائىتىدا.تۇتاشتۇرۇلغان تروفوزويىتلار مۇز ئۈستىدە يىغىۋېلىنىپ ، كۆپىيىش ئۈچۈن 1: 4 نىسبەتتە يەتكۈزۈلدى.
Gierdia Deducedeed Myders بايان قىلىنغاندەك, مۇندەرىخور باياناتىدا يىغىۋېلىنغاندەك, تروپخولخورلۇق باسقۇچلۇق بايان قىلىنغان, ئاندىن CHACCOPE INTORICATION نىڭ 1 × 106 T-S-S- 33) ML.ئۆت سۇيۇقلۇقى% 0.05 ئوتتۇراھال).تروفوزويىتلار ئاناروبىك شارائىتىدا ° C 37 قا چىقىپ ، لوگارىزىمنىڭ ئۆسۈپ يېتىلىش باسقۇچىغا قەدەر يېتىشتۈرۈلگەن.ئوتتۇراھالنى سىستىما پەيدا قىلىدىغان ئوتتۇراھالغا ئۆزگەرتىڭ (pH 7.8; ئۆزگەرتىلگەن TYI-S-33 ئوتتۇراھال% 1 لىك ئۆت سۇيۇقلۇقى) ۋە مەدەنىيەت G. duodenalis 37 ° C دىن 48-96 سائەتكىچە ، بۇ جەرياندا مىكروسكوپتا شەكىللىنىش سىستىمىسى كۆرۈلدى.تروپوزوئىتلارنىڭ كۆپىنچىسى خالتىلىق ئىششىق پەيدا قىلىپ بولغاندىن كېيىن ، مەدەنىيەت ئارىلاشمىسى يىغىۋېلىنىپ ، ستېرېئونسىزلاشتۇرۇلغان سۇدا توختاپ قېلىپ ، قالغان تروفوزوئىتنى يالغانغا چىقاردى.چاشقاندىكى ئاشقازان نەيچىسى ئارقىلىق كېيىنكى ئانالىزلار ئۈچۈن خالتىلىق خالتىلار سانالغان ۋە ° C4 قا چىققان.
گىئارديا تاشقى ھۈجەيرە تومۇرلىرى (GEV) ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەندەك بېيىغان [13].لوگارىزىمنىڭ ئۆسۈپ يېتىلىش باسقۇچىدىكى تروفوزويىت ئۆزگەرتىلگەن TYI-S-33 ۋاستىسىدە ئەسلىگە كەلتۈرۈلگەن بولۇپ ، ئېكولوگىيىلىك خورىغان FBS (بىئولوگىيە سانائىتى ، بەيت-خامېك ، ئىسرائىلىيە) بىلەن ئەڭ ئاخىرقى قويۇقلۇقى 1 × 106 پارازىت قۇرت / mL بولۇپ ، 12 سائەت سىڭدۈرۈلگەن.2000 گىرامدا 10 مىنۇت ، 10 مىڭ گرام 45 مىنۇت ، 100 مىڭ گرام 60 مىنۇتتا مەركەزدىن قاچۇرۇش ئارقىلىق مەدەنىيەت خاسىيەتلىك ئادەمدىن ئايرىۋېتىلدى.چۆكمە فوسفات بۇففېرلىق تۇز (PBS) دا ئېرىپ ، BCA ئاقسىل تەكشۈرۈش ئەسۋابى (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) ئارقىلىق مىقدارلاشتۇرۇلۇپ ، ° C80- ° C قا ساقلانغان ياكى بىۋاسىتە تەھلىل قىلىشقا ئىشلىتىلگەن.
چاشقىنەكنىڭ دەسلەپكى ماكرو پەردىسى ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەندەك تەييارلانغان [24].قىسقىچە قىلىپ ئېيتقاندا ، چاشقانلار (6-8 ھەپتە ئارىلىقىدا) ئوكۇل ئۇرۇلدى (ئوپېراتسىيىدىن ھالقىغان)چاشقاننىڭ قورساق بوشلۇقىدىن ماكرو پەردىنىڭ ئاسما جازىسى يىغىۋېلىنىپ ، 1000 گرامدا 3 قېتىم مەركەزلەشتۈرۈلۈپ 10 مىنۇت.يىغىۋېلىنغان ھۈجەيرىلەر CD11b بەلگىسىنى ئىشلىتىپ ئېقىن سىتومېتىرىيىسى ئارقىلىق ھۈجەيرىلەرنىڭ ساپلىقى% 98 بولغۇچە بايقالغان ، ئاندىن 6 قۇدۇق ھۈجەيرە مەدەنىيەت تاختىلىرىغا (4.5 x 106 ھۈجەيرە / قۇدۇق) قوشۇلغان ۋە ° C 37 قا ° C 10 بولغان.and 5% CO2.
RNA 1 × 107 تروپوزوئىتتىن 1 مىللىلېتىر TRIzol رېئاكتورى (Vazyme, نەنجىڭ ، جۇڭگو) دىن ئېلىنغان ، گېن گېن DNA MonScript dsDNase (جۇڭگونىڭ موناد ، ۋۇخەن) دىن پايدىلىنىپ تولۇقلانغان. ئىشلەپچىقارغۇچىنىڭ كۆرسەتمىسى بويىچە MonScript RTIIII Super Mix (Monad) نى ئىشلىتىڭ.
نىشان G. duodenalis گېنىنىڭ CDS رەت تەرتىپى NCBI GenBank دىن ئېلىنغان.Primer 5.0 نى ئىشلىتىپ ھەر بىر نىشان گېنى ئۈچۈن ئالاھىدە يوچۇقسىز كلونلاش لايىھىسىنى لايىھىلەڭ.ئالدى كۆرسەتكۈچ (5′-3 ′) ئۈچ قىسىمدىن تەركىب تاپقان: سىزىقلىق ۋېكتور pcDNA3.1 (+) EcoRV (TGGTGGAATTCTGCAGAT) بىلەن قاپلىنىش تەرتىپى ۋە ATG ۋە GNN كودلىرىنى قوزغىتىش (ئەگەر بىرىنچى ئاساسى G بولمىسا).بۇ ئىپادىلەش ئۈنۈمىنى ئاشۇرۇش ئۈچۈن ئېلىپ بېرىلىدۇ.بۇنىڭدىن باشقا ، كەم دېگەندە 16 bp بىرلەشتۈرۈلگەن بازا (GC مەزمۇنى 40-60% / Tm تەخمىنەن 55 ° C).تەتۈر يۆنىلىشلىك كۆرسەتكۈچ (5′-3 ′) ئىككى قىسىمدىن تەركىب تاپقان بولۇپ ، EcoRV سىزىقلىق ۋېكتور pcDNA3.1 (+) (GCCGCCACTGTGCTGGAT) بىلەن قاپلىنىش تەرتىپى ۋە كەم دېگەندە 16 bp.(ئاخىرقى ئىككى بېكەتنى ئۆز ئىچىگە ئالمايدۇ).بازا) AA ياكى GA غا ئوخشاش كود يەشكۈچ پىلازمىلارنىڭ بەلگە قويۇلغان ئاقسىلنى ئىپادىلىشىگە يول قويىدۇ).دەسلەپكى تەرتىپلەر 1-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەن بولۇپ ، كاڭمېت بىئوتېخنىكا چەكلىك شىركىتى (جۇڭگو چاڭچۈن) تەرىپىدىن بىرىكتۈرۈلگەن.
نىشانلار Pfu DNA پولىمېراسى (تيەنگېن ، بېيجىڭ ، جۇڭگو) ياكى Ex-taq (تاكارا بىئو-مېدىتسىنا تېخنىكىسى [بېيجىڭ] چەكلىك شىركىتى ، بېيجىڭ ، جۇڭگو) ئارقىلىق تەييارلانغان G. duodenalis cDNA نى قېلىپ قىلىپ كېڭەيتىلدى.ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش ۋېكتورى پىلازما pcDNA3.1 (+) چەكلەش فېرمېنتى EcoRV بىلەن تۈز سىزىقلىق بولۇپ ، تېز AP (تېرمو فىشېر ئىلمىي) ئارقىلىق دېفوسفورلانغان.سىزىقلىق pcDNA3.1 (+) پارچىلىرى ۋە كۈچەيتىلگەن نىشانلىق گېن پارچىلىرى DNA گېلىنى تازىلاش زاپچىسى (تيەنگېن) ئارقىلىق ساپلاشتۇرۇلدى ۋە نانودروپ ND-2000 (تېرمو فىشېر ئىلمىي) ئارقىلىق مىقدارلاشتۇرۇلدى.PcDNA3.1 (+) پارچىسى ۋە ھەر بىر نىشان گېن پارچىسى MonClone يەككە قۇراشتۇرۇش كلون ئارىلاشمىسى (موناد بىئوتېخنىكا چەكلىك شىركىتى ، سۇجۇ ، جۇڭگو) ئارقىلىق قايتا بىرلەشتۈرۈلۈپ ، Comate Bioscience Company Limited (جۇڭگونىڭ چاڭچۈن) دىن پايدىلىنىپ DNA تەرتىپى ئارقىلىق دەلىللەندى..
ئېندوتوكسىنسىز پلازما pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 ۋە pcDNA3.1 (+) - ئالفا-7.3 سانپرېپ ئېندوتوكسىنسىز پلازماد كىچىك زاپچىسى (Sangon Biotech) ئارقىلىق بارلىققا كەلگەن.قويۇقلۇقى 500 ng / µl دىن يۇقىرى ھالەتتە ساقلىنىپ ، سۈزگۈچ بۇففېردىكى EDTA نىڭ يۆتكىلىشكە تەسىر يەتكۈزمەسلىكىگە كاپالەتلىك قىلىندى.دەسلەپكى چاشقىنەك ئەتراپىدىكى ماكرو پەردىلەر تولۇق قۇدۇق تاختىسىدا تولۇق RPMI 1640 ئوتتۇرا (بىئولوگىيىلىك سانائەت) بىلەن 12 سائەت يېتىلدۈرۈلگەن ، ئاندىن ھۈجەيرىلەرنى ئىللىق PBS دا 3 قېتىم يۇيۇپ ، پېنىتسىللىن ۋە سترېپتومىيسىننى چىقىرىۋەتكەن ، ئاندىن تولۇق ئوتتۇرا تولۇقلانغان.ئېندوتوكسىنسىز پلازما pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 ۋە pcDNA3.1 (+) - ئالفا-7.3 (2.5 mg) ئوپتى- MEM تۆۋەنلىتىلگەن قان زەردابىنىڭ 125 مىللىمېتىردا سۇيۇلدى (Gibco ، تېرمو فىشېر ئىلمىي)..ئاندىن 5 µl Lipofectamine 2000 نىڭ يۆتكىلىش رېئاكتورى (Invitrogen, Thermo Fisher Scientific) 125 µl تۆۋەن قان زەردابى Opti-MEM ۋاستىسىدە سۇيۇلدى.سۇيۇقلاندۇرۇلغان ئېندوكسىنسىز پلازما بىلەن Lipofectamine 2000 نى ئارىلاشتۇرۇپ ، ئارىلاشما ماددىنىڭ ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 5 مىنۇت تۇرغۇزۇشى ئارقىلىق ياغ ئاقسىلى- DNA قۇرۇلمىسىنى تەييارلاڭ.مۇرەككەپ ماددىلارنى ھەر بىر قۇدۇقتىكى ھۈجەيرىلەرگە ئايرىم يۆتكەڭ ۋە ئاستا ئارىلاشتۇرۇڭ.4 سائەتتىن كېيىن ، ھۈجەيرە مەدەنىيەت ۋاستىسى 2 مىللىلېتىر تولۇق RPMI 1640 ئوتتۇراھال ئالماشتۇرۇلدى ۋە مەدەنىيەت 24 سائەت داۋاملاشتى.يېڭى ھۈجەيرە مەدەنىيەت ۋاستىسى ھۈجەيرىلەرگە قوشۇلدى ۋە تەكشۈرۈش لايىھىسىگە ئاساسەن ھەر خىل ۋاقىت نۇقتىلىرىغا سىڭدۈرۈلدى.
خاسىيەتلىك ماددىلار ۋە ھۈجەيرە لىماتلىرىنىڭ ئاقسىل ئەۋرىشكىسى ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەندەك تەييارلانغان [25].IL-1β ، كاسپازا 1 ، كاسپازا -1 p20 ، NLRP3 ، act- ئاتىن ۋە ئۇنىڭ بەلگىسىنىڭ پەردىسىنى يۆتكەش پارامېتىرلىرى 200 mA / 90 min.Interleukin 1β (IL-1β; R&D Systems, Minneapolis, Minnesota, USA), caspase-1 (p20) (Adipogen, شىۋىتسارىيە) ۋە NLRP3 (Adipogen SA, Epalinges, شىۋىتسارىيە) ۋە 1: 5000 ئۇنىڭ بەلگىسىنى نىشانلىدى (Amylet Scientific, ۋۇخەن ، جۇڭگو) ۋە act- ئاتىن (Proteintech ، ۋۇخەن ، جۇڭگو).
Disuccinimide suberate (DSS) بىلەن ئۆز-ئارا ئۇلىنىش ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەندەك ئېلىپ بېرىلدى [26].ھۈجەيرىلەر سوغۇق PBS بىلەن 3 قېتىم يۇيۇلدى ۋە 50 µl ASC رېئاكسىيە بۇففېر (pH 8.0) دىكى 27 ئۆلچەملىك يىڭنە بىلەن تولۇق لۆمۈلدىدى ، تەركىبىدە 25 mM Na2PO4 ، 187.5 mM NaCl ، 25 mM HEPES ۋە 125 mM NaHCO3 بار.بۇ ئارىلاشما 5000 گرامدا 3 مىنۇت مەركەزلەشتۈرۈلۈپ ، پېلەك 10 µl DSS (DMSO دىكى 25 mM) ۋە 40 µl ASC رېئاكسىيە بۇففېر بىلەن 30 سېلسىيە گرادۇستا 30 مىنۇت تىكىلدى.5000 گرامدىن 10 مىنۇتقىچە مەركەزلەشتۈرۈلگەندىن كېيىن ، پېلەك 40 µl ASC رېئاكسىيە بۇففېر ۋە 10 µl 6x ئاقسىل قاچىلاش بۇففېر ئېرىتمىسىدە ئېرىتىلگەن (TransGen, بېيجىڭ ، جۇڭگو) ، ئاندىن ھەل قىلىش چارىسى ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 15 قېتىم ئۆچۈرۈلگەن. min.، ئاندىن 10 مىنۇت قاينىتىڭ.ئاندىن ئاقسىل ئەۋرىشكىسى 1: 500 لىك سۇيۇقلۇق نىسبىتىدە دەسلەپكى ASC غا قارشى ئانتىتېلا (ۋانلېيبىئو ، شېنياڭ ، جۇڭگو) دىن پايدىلىنىپ غەربنىڭ پارچىلىنىشىغا ئۇچرىغان.
ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەن تەرتىپكە ئاساسەن [13] ، ھۈجەيرە مەدەنىيەت خاسىيەتلىك ماددىلىرى يىغىۋېلىندى ۋە ياللۇغ قايتۇرىدىغان سىتوكىن IL-1β نىڭ ئاجرىلىپ چىقىشى مائۇس IL-1 Beta ELISA زاپچاسلىرى (Invitrogen, Thermo Fisher Scientific) ئارقىلىق بېكىتىلدى.OD450nm قىممىتىنى IL-1β ئۆلچەملىك ئەگرى سىزىق ئارقىلىق ئاقسىل قويۇقلۇقىغا ئايلاندۇرۇڭ.
يېپىنچا قاپلانغان ھۈجەيرىلەر ئىللىق PBS دا 3 قېتىم ئاستا-ئاستا يۇيۇلدى ، توقۇلما ھۈجەيرىلەرنى ئوڭشاش (بىيوشارپ ، بېيجىڭ ، جۇڭگو) ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 10 مىنۇت تۇرغۇزۇلدى ،% 0.1 لىك Triton X-Permeabilize 100 دە (PBS دا سۇيۇلدى ؛ Biosharp) ) ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 20 مىنۇت تۇرغۇزۇپ ،% 5 كالا قان زەردابى پىلاستىنكىسى (PBS دا) ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 2 سائەت توسۇڭ.ئاندىن ھۈجەيرىلەر ئايرىم-ئايرىم ھالدا 4 سېلسىيە گرادۇسلۇق يۇقىرى تېمپېراتۇرىدا ASC (1: 100 سۇيۇلۇش) ياكى NLRP3 (1: 100 سۇيۇلۇش) غا قارشى ئانتىتېلا بار ، Cy3 غا ئۆچكە توشقانغا قارشى IgG (H + L) (1: 400 ؛ EarthOx) دەپ بەلگە قويۇلغان. ، سان فىرانسىسكو ، CA ، ئامېرىكا) ياكى FITC ئۇلانغان ئۆچكە چاشقانغا قارشى IgG (1: 400; Earthox) بىر كېچىدىلا 37 سېلسىيە گرادۇسلۇق قاراڭغۇدا 1 سائەت.بۇ يادروغا Hoechst 33258 (10 mg / ml;
چاشقانلار تۆت گۇرۇپپىغا ئايرىلدى (ھەر گۇرۇپپىدا n = 7): (i) PBS بىر تەرەپ قىلىنغان سەلبىي كونترول گۇرۇپپىسى (پەقەت PBS ؛ gavage 100 µl / مائۇس PBS ، ئاندىن 3 سائەتتىن كېيىن كۈندىلىك ئوپېراتسىيىگە 100 µl / مائۇس PBS).ئۇدا 7 كۈن)(2) MCC950 ئىنگىبىتور بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان پاسسىپ كونترول گۇرۇپپىسى (27)..ھەر بىر چاشقاننىڭ بەدەن ئېغىرلىقى ھەر كۈنى كۆزىتىلىپ ، 7-كۈنى بارلىق چاشقانلار سىرتقا چىقىرىۋېتىلدى.يىغىۋېلىنغان ئون ئىككى بارماق ئۈچەي (ئۇزۇنلۇقى 3 سانتىمېتىر) 1 مىللىمېتىر PBS دا كىچىك پارچىلارغا بۆلۈندى ، خالتىلىق ئىششىق PBS دا بىر كېچىدىلا 4 سېلسىيە گرادۇستا بۇزۇلدى ، G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي تاياقچە باكتېرىيەسى.يېڭى ئون ئىككى بارماق ئۈچەي (ئۇزۇنلۇقى 1 سانتىمېتىر) گېماتوكسىلىن ۋە ئېسىن (H&E) داغ ئۈچۈن ئايرىۋېتىلدى.
چاشقانلار ئىككى گۇرۇپپىغا ئايرىلدى: (i) MOCK كونترول گۇرۇپپىسى ۋە (ii) MCC950 چەكلەش گۇرۇپپىسى.ھەر گۇرۇپپىدا بەش خىل داۋالاش ئۇسۇلى بار (n = 7 / داۋالاش گۇرۇپپىسى): (i) PBS داۋالاش مەنپىي كونترول گۇرۇپپىسى (پەقەت PBS ؛ 100 µl / مائۇس PBS ، مۇسكۇل مۇسكۇلى (IM) ئوكۇلى (داس سۆڭىكى ئالدى) ii) pcDNA3.1 (+) پىلازما مەنپىي كونترول گۇرۇپپىسى (100 µg / مائۇس DNA ، مۇسكۇل مۇسكۇلى ئارقىلىق ئوكۇل ئارقىلىق) پلازما pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 (100 μ mg / مائۇس DNA ، مۇسكۇل مۇسكۇلى ئوكۇلى ئارقىلىق) داۋالانغان گۇرۇپپا ، (v) پىلازما pcDNA3.1 (+) - ئالفا-7.3 (100 µg / مائۇس) DNA ، 12 سائەت يول يۈرگەندىن كېيىن ، MCC950 چەكلەش گۇرۇپپىسىدىكى چاشقانلار ھەر كۈنى MCC950 (بەدەن ئېغىرلىقى 10 مىللىگىرام) ئوكۇلنى ئوكۇل قىلىپ 7 كۈن قوبۇل قىلدى ، MOCK گۇرۇپپىسىدىكى چاشقانلارمۇ ئوخشاش مىقداردىكى PBS داۋالاشنى قوبۇل قىلدى. قان ئەۋرىشكىسى كۆز چاشقىنىدىن يىغىۋېلىنىپ ، ° C4 قا كېچىدە قويۇپ بېرىلدى. قان زەردابى ئەۋرىشكىسى IL-1β سەۋىيىسىنى ئۆلچەش ۋە فېرمېنت بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئىممۇنىتېت ئوپېراتسىيىسى (ELISA) ئارقىلىق ئايرىۋېتىلدى.
35 چاشقان بەش گۇرۇپپىغا ئايرىلدى (n = 7 / گۇرۇپپا).1-گۇرۇپپا PBS بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان سەلبىي كونترول گۇرۇپپىسى: چاشقانلار مۇسكۇلدىن 100 مىللىمېتىر PBS نى قوبۇل قىلدى ، 3 كۈندىن كېيىن گاۋگا ئارقىلىق.2-گورۇن بولسا G. DuroOdalis خالتىسى بىلەن يۇقۇملانغان ئاكتىپ كونترول گۇرۇپپىسى: چاشقانلار 100 μ لولى بىلەن ياسانت قاتار: ھەمدە 3 كۈندىن كېيىن 3 كۈندىن كېيىن 1.5 X 106 خورازلار ئوكۇلتۇرۇدى.ئۈچىنچى گۇرۇپپا - پىلازما ئىممۇنىتېتلاش pcDNA3.1 (+) بىلەن ئون ئىككى بارماق ئۈچەي خالتىلىق ئىششىقىنىڭ يۇقۇملىنىشىنى كونترول قىلىش گۇرۇپپىسى بىلەن بىرلەشتۈرۈلۈپ: چاشقانلار 100 mgg پىلازما DNA pcDNA3.1 (+) (im) ئېغىزدىن ، 1.5 × 106 خالتىلىق خالتىلىق چاشقان / چاشقان 3 كۈنلەر.4-ۋە 5-گۇرۇپپىلار قايتا ھاسىل بولغان pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 گىئاردېن پلازمىسى ياكى pcDNA3.1 (+) - ئالفا -7.تەجرىبە گۇرۇپپىسى: چاشقانلار 100 µg pcDNA3 قوبۇل قىلدى.1 (+) - گىئاردېن پىلازمىسى DNA (im) ، ئاندىن 3 كۈندىن كېيىن ، 1.5 × 106 خالتىلىق خالتىلىق چاشقان چاشقانغا ئوكۇل قىلىندى.ھەر بىر چاشقاننىڭ بەدەن ئېغىرلىقى G. duodenalis سىستىمىسى تۇرۇبا ئارقىلىق كىرگۈزۈلگەندىن كېيىن تەكشۈرۈلگەن.يېڭى ئون ئىككى بارماق ئۈچەي پارازىت يۈكىنى ئۆلچەش ۋە HE داغ ئانالىزى ئۈچۈن توپلانغان.
گىستوپولوگىيەلىك ئۆزگىرىش ئىلگىرى ئېلان قىلىنغان تەرتىپ بويىچە تەھلىل قىلىنغان [30].يېڭى داس بوشلۇقى توقۇلما ھۈجەيرىسىنى ئوڭشاش ئارقىلىق ئوڭشالدى ، پارفىنغا قىستۇرۇلدى ، 4 مىللىمېتىر بۆلەككە بۆلۈندى ، H&E بىلەن بويالدى ۋە يېنىك مىكروسكوپتا ئانالىز قىلىندى.يەتتە مۇستەقىل چاشقاننىڭ يەتتە توقۇلما بۆلىكىدىكى ۋەكىللىك كېسەللىك ئۆزگىرىشى داۋالاشنى بىلمەيدىغان پاتولوگ تەرىپىدىن باھالانغان ۋە 200x چوڭايتىشتا قولغا ئېلىنغان.داچىنىڭ ئۇزۇنلۇقى ۋە شىفىرلارنىڭ چوڭقۇرلۇقى ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەن ئۇسۇللار بىلەن ئۆلچەنگەن.
ۋىرۇس ۋە vivo دىكى نەتىجىلەر ئۈچ ھەسسە قولغا كەلتۈرۈلدى.گرافىك GraphPad Prism 7.00 (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, US) ئارقىلىق ھاسىل قىلىنغان.ئىككى گۇرۇپپىنىڭ پەرقى t- سىناق ئارقىلىق ئانالىز قىلىنغان ، ≥3 گۇرۇپپىنىڭ پەرقى SPSS يۇمشاق دېتالى (22.0 نەشرى ؛ SPSS IBM Corp. ، Armonk ، NY ، ئامېرىكا) نىڭ ئوخشىماسلىق (ANOVA) نى تاق يۆنىلىشلىك تەھلىل قىلىش ئارقىلىق تەھلىل قىلىنغان.لېۋېننىڭ سىنىقىدىن كېيىن Bonferroni نىڭ پوچتىسى مەخسۇس سىنىقى (B) دىن پايدىلىنىپ ، ئوخشاشلىقنىڭ ئوخشاشلىقى ئۈچۈن سانلىق مەلۇماتلار ئانالىز قىلىندى.ئەھمىيىتى P <0.05 ، P <0.01 ۋە P <0.001 (مۇھىم ئەمەس [ns]) (P> 0.05) دەپ ئىپادىلىنىدۇ.
بىزنىڭ گېن ۋە گېنلارنىڭ كيوتو ئېنسىكلوپېدىيىسى (KEGG) دىكى GEV ئاقسىلىنى ئانالىز قىلىشىمىز شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، نۇرغۇن نىشانلار ياللۇغ سىگنال يولىنى قوزغىتىشقا قاتناشقان بولۇشى مۇمكىن.بىز ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىئارددىن ئىبارەت ئىككى ئىستىقباللىق نىشاننى تاللىدۇق ، بۇ مولېكۇلالارنى كۈچەيتىپ ، pcDNA3.1 (+) ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش ۋېكتورى قۇردۇق.تەرتىپكە سېلىنغاندىن كېيىن ، قايتا ھاسىل بولىدىغان pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېن ئىپادىلەش پلازمىسى دەسلەپكى چاشقان ئەتراپىدىكى ماكرو پەردىگە ئالماشتۇرۇلدى ، كاسپازا -1 p20 ئىمزا ئاقسىلى (ئاكتىپلانغان كاسپازا -1 نىڭ بىر قىسمى) ئېنىقلاندى. ياللۇغنى قوزغايدىغان ئاچقۇچلۇق مولېكۇلالارنى ئېنىقلاش.نەتىجىدە كۆرسىتىلىشچە ، ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىگانتلىرى GEV غا ئوخشاش p20 كاسپازا -1 ئىپادىسىنى قوزغىتالايدۇ.بىر تەرەپ قىلىنمىغان پاسسىپ كونترول (پەقەت PBS) ۋە پلازما كونترول pcDNA3.1 (+) دە كاسپازا -1 قوزغىتىشقا ھېچقانداق تەسىر تېپىلمىدى (1-رەسىم).
PcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىئارىدىن p20 كاسپازا -1 ئاكتىپلاشنى ئۆلچەش.قايتا ھاسىل بولىدىغان ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش پلازمىسى pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېن (ھەر بىر يولنىڭ ئۈستىدە) دەسلەپكى چاشقان ئەتراپىدىكى ماكرو شەكىلگە ئالماشتۇرۇلدى ۋە 24 سائەتتىن كېيىن مەدەنىيەت خاسىيەتلىكلىرى يىغىۋېلىندى.غەربنىڭ پارچىلىنىشى ئىمزالىق كاسپازا -1 p20 ياللۇغلىنىش ئاقسىلىنىڭ ئىپادىلىنىش دەرىجىسىنى ئۆلچەشكە ئىشلىتىلگەن.پەقەت PBS نىلا داۋالاش گۇرۇپپىسى (C لىنىيىسى) ۋە pcDNA3.1 (+) يەككە داۋالاش گۇرۇپپىسى (pcDNA3.1 يولى) مەنپىي كونترول قىلىندى ، GEV داۋالاش گۇرۇپپىسى ئاكتىپ كونترول قىلىندى.قايتا ھاسىل بولىدىغان ئاقسىلنىڭ ئىپادىلىنىشى ھەر بىر ئاقسىلدا گىستودىن بەلگىسىنى بايقاش ئارقىلىق ئىسپاتلانغان بولۇپ ، مۆلچەرلەنگەن ئاقسىل گۇرۇپپىسىنىڭ ئالفا -2 گىئاردېن (38.2 kDa) ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېن (37.2 kDa) ئىكەنلىكى ئىسپاتلانغان.GEV ، Giardia ئون ئىككى بارماق ئۈچەي تاشقى ھۈجەيرە ، pcDNA3.1 (+) ، EcoRV سىزىقلىق ۋېكتور ، SUP ، خاسىيەتلىك كېمە
ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېننىڭ p20 كاسپازا -1 ئىپادىسىنى پەيدا قىلغان-قىلمىغانلىقىنى ئېنىقلاش ھەمدە ساھىبجامال NLRP3 ياللۇغ قايتۇرۇش ئىنكاسىنى قوزغىتىش رولىنى ئوينايدۇ ، pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 گىئاردېن ۋە pcDNA3.1 (+) - ئالفا -7.3 گىئاردېن قايتا ھاسىل بولىدىغان پىلازما DNA بىلەن دەسلەپكى چاشقان ئەتراپىدىكى ماكرو پەردىگە ئالماشتۇرۇلدى ، ئاچقۇچلۇق ياللۇغلىنىش ئاقسىلى NLRP3 نىڭ ئىپادىلەش دەرىجىسى ، يەرلىكلەشتۈرۈلۈشى ۋە ئولىگومېرلىشىش دەرىجىسى بېكىتىلدى.بۇ سىناقتا ، GEV مۇسبەت كونترول گۇرۇپپىسى سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن ، ھېچقانداق داۋالاش گۇرۇپپىسى (پەقەت PBS) ياكى pcDNA3.1 (+) يۇقۇملىنىشنى داۋالاش گۇرۇپپىسى مەنپىي گۇرۇپپا ئەمەس.نەتىجىدە كۆرسىتىلىشىچە ، GEV گۇرۇپپىسىدىكىگە ئوخشاش ، گىئاردېن pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 ۋە گىئاردېن pcDNA3.1 (+) - ئالفا-7.3 نىڭ قايتا ھاسىل بولىدىغان پىلازما DNA نەتىجىسى NLRP3 ، IL-1β نى قوللايدۇ. procaspase-1 ۋە caspase-1 قوزغىتىش (2a رەسىم).بۇنىڭدىن باشقا ، ھەر ئىككى گىگانت ئادەم كۆرۈنەرلىك IL-1β ئاجرىتىپ چىقىرىشنى كەلتۈرۈپ چىقاردى (pcDNA3.1: ANOVA, F (4, 10) = 1.625, P = 0.1000; alpha-2 giardine: ANOVA, F (4, 10) = 1.625, P = 0.0007 ).;alpha-7.3 giardine: ANOVA, F (4, 10) = 1.625, P <0.0001;GEV: ANOVA, F (4, 10) = 1.625, P = 0.0047) (2b رەسىم).كۆپىنچە ASC ئاقسىلى داۋالاش گۇرۇپپىسىدا ياكى pcDNA3.1 (+) پىلازمىسى بىلەن ئالماشتۇرۇلغان داۋالاش گۇرۇپپىسىدا يەككە ھالەتتە ئىدى ، pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 ياكى pcDNA3.1 (+) - ئالفا- 7.3 giardine.ASC oligomerization GEV مۇسبەت كونترول گۇرۇپپىسى ياكى گۇرۇپپىنىڭ قايتا ھاسىل بولىدىغان پىلازما DNA دا يۈز بەرگەن بولۇپ ، ئولىگومېرلىق شەكىلنى كۆرسەتكەن (2c رەسىم).بۇ دەسلەپكى سانلىق مەلۇماتلاردا كۆرسىتىلىشىچە ، ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا -3،3 گىئاردېن NLRP3 ياللۇغلىنىشنى قوزغىتىدىكەن.ASC ۋە NLRP3 نىڭ يەرلىكلەشتۈرۈلۈشىنىڭ كېيىنكى ئىممۇنىتېت كۈچى تەتقىقاتى شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، مەنپىي كونترول گۇرۇپپىسىدا ، ASC ئاقسىلى سىتوپلازمانىڭ ھەر قايسى جايلىرىغا تارقالغان ۋە pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 بىلەن گىئاردېن ياكى pcDNA3 غىدىقلانغاندىن كېيىن چېكىت سىگنالى سۈپىتىدە پەيدا بولغان.1 (+) - ئالفا -3،3 گىئاردېن گۇرۇپپىسى ياكى GEV مۇسبەت كونترول گۇرۇپپىسى (2d رەسىم).مەنپىي كونترول ۋە پلازما ئارقىلىق بىر تەرەپ قىلىنغان pcDNA 3.1 گۇرۇپپىسىدا ، NLRP3 ئاقسىل سىگنالى بايقالمىدى ، pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 گىئاردېن ياكى pcDNA3.1 (+) - ئالفا-7.3 بايقالدى..گىئاردېن سىتوپلازمىدا ياكى HEV نىڭ غىدىقلىشىدا ئۇچرايدۇ (2e رەسىم).بۇ سانلىق مەلۇماتلار G. duodenalis giardin alpha-2 ۋە giardin alpha-7.3 نىڭ چاشقاننىڭ دەسلەپكى ئەتراپىدىكى ماكرو پەردىسىدە NLRP3 ياللۇغىنى قوزغىتىدىغانلىقىنى تېخىمۇ ئىسپاتلايدۇ.
pcDNA3.1.قايتا ھاسىل بولىدىغان ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش پلازمىسى pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 گىئاردېن ۋە pcDNA3.1 (+) - ئالفا -7. , secretion.ھەمدە ئاچقۇچلۇق ياللۇغلىنىش ئاقسىلىنىڭ يەرلىكلىشىشى.پەقەت PBS (C) گۇرۇپپىسى ۋە pcDNA3.1 (+) يەككە داۋالاش گۇرۇپپىسى مەنپىي كونترول سۈپىتىدە ، GEV داۋالاش گۇرۇپپىسى ئاكتىپ گۇرۇپپا سۈپىتىدە ئىشلىتىلدى.ئاچقۇچلۇق ياللۇغلىنىش ئاقسىلى NLRP3 ، NLRP3 ، IL-1β ، كاسپازا -1 ۋە p20 كاسپازا -1 قاتارلىقلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.b خاسىيەتلىك ماددىدىكى IL-1β نىڭ ئاجرىلىپ چىقىش دەرىجىسى فېرمېنت بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئىممۇنىتېت ئوپېراتسىيەسى (ELISA) ئارقىلىق بېكىتىلدى.كونترول قىلىش ۋە تەجرىبە گۇرۇپپىلىرىنىڭ پەرقى SPSS يۇمشاق دېتالىنىڭ 22.0 نەشرىنى ئىشلىتىپ ئۆزگىرىشچان (ANOVA) نى تاق يۆنىلىشلىك تەھلىل قىلىش ئارقىلىق تەھلىل قىلىنغان.يۇلتۇزلار گۇرۇپپىسى ** P <0.01 بىلەن *** P <0.001 ئارىسىدىكى كۆرۈنەرلىك پەرقنى كۆرسىتىدۇ.c پېلەكتىكى ASC oligomerization سەۋىيىسى DSS ئۆز-ئارا ئۇلىنىش ئانالىزى تەرىپىدىن بەلگىلىنىدىغان بولسا ، ھۈجەيرە لىماتلىرىدىكى ASC دەرىجىسى يۈكنى كونترول قىلىش ئورنىدا ئىشلىتىلگەن.d ئىممۇنىتېت كۈچىدىن پايدىلىنىپ ISC يەرلىكلەشتۈرۈشنى تەسۋىرلەش.e Immunofluorescence NLRP3 نىڭ يەرلىكلەشتۈرۈلۈشىنى تەسۋىرلەشكە ئىشلىتىلگەن.ASC ، ئاپتوماتىك داغغا ئوخشاش ئاقسىلIL, interleukin;NLRP3 ، يادرونى باغلايدىغان ئولىگومېرلىشىشقا ئوخشاش قوبۇللىغۇچ 3ns, not significant (P> 0.05)
G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ۋە ئۇ ئاجرىتىپ چىقارغان GEV لار NLRP3 ياللۇغىنى قوزغىتىدۇ ۋە ۋىرۇستا ساھىبجامال ياللۇغ قايتۇرۇشنى تەڭشەيدۇ.شۇڭا ، NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي كېسەللىكىنىڭ پەيدا بولۇشىدىكى رولى ئېنىق ئەمەس.بۇ مەسىلىنى تەكشۈرۈش ئۈچۈن, بىز K. Durowedalis Cygst + Mingdentalis CHST لار بىلەن يۇقۇملانغان, G. Duromdalis Cyst بىلەن يۇقۇملانغان.سىناقنىڭ تەپسىلىي پىلانى 3a رەسىمدە كۆرسىتىلدى.ئوخشىمىغان داۋالاش گۇرۇپپىسىدىكى چاشقانلارنىڭ بەدەن ئېغىرلىقىنىڭ ئۆزگىرىشى خالتىلىق ئىششىق بىلەن يۇقۇملانغاندىن كېيىن 7 كۈن كۆزىتىلدى ، نەتىجىدە 3b رەسىمدە كۆرسىتىلدى.ساپ PBS بىلەن داۋالانغان گۇرۇپپىغا سېلىشتۇرغاندا ، نەتىجىدە كۆرسىتىلىشىچە ، (1) G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغى بىلەن يۇقۇملانغان چاشقانلارنىڭ بەدەن ئېغىرلىقى يۇقۇملانغاندىن كېيىنكى 3-كۈندىن 7-كۈنىگىچە تۆۋەنلىگەن.(2) MCC950 چەكلىگۈچ بىلەن داۋالاش چاشقانلارنىڭ بەدەن ئېغىرلىقىغا كۆرۈنەرلىك تەسىر كۆرسەتمىدى..يەككە يۇقۇملىنىش گۇرۇپپىسىغا سېلىشتۇرغاندا ، MCC950 دا داۋالانغان ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغى گۇرۇپپىسىنىڭ BW ئوخشىمىغان دەرىجىدە تۆۋەنلىدى (1-كۈنى: ئانوۋا ، F (3 ، 24) = 1.885 ، P = 0.0148 ؛ 2-كۈنى: ئانوۋا ، F (3 ، 24) ) = 0.4602, P <0.0001; 3-كۈنى: ANOVA, F (3, 24) = 0.8360, P = 0.0010 كۈن (3, 24) = 0.6497, P = 0.0645;بۇ سانلىق مەلۇماتلار NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىنىڭ دەسلەپكى باسقۇچىدا (2-4 كۈن) چاشقاننى كۆرۈنەرلىك ئورۇقلاشتىن ساقلايدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.ئاندىن بىز ئون ئىككى بارماق ئۈچەي سۇيۇقلۇقىدىكى G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي تاياقچە باكتېرىيەسىنى بايقاشنى مەقسەت قىلدۇق ، نەتىجىدە 3c رەسىمدە كۆرسىتىلدى.G. DuroOdentalis Cyst گۇرۇپپىسىغا سېلىشتۇرغاندا, قۇرۇلتايدىكى تروفورتونىڭ سانى كۆرۈنەرلىك ئاشتى (t (12) = 2.902, p = 0.0133).HE بىلەن داغلانغان ئون ئىككى بارماق ئۈچەي توقۇلمىسى پەقەت PBS ۋە MCC950 بىلەن بىر تەرەپ قىلىنغان سەلبىي كونترولغا سېلىشتۇرغاندا: ) ۋە crypt atrophy (ANOVA, F (3, 24) = 0.4716, P = 0.0089);iiئون ئىككى بارماق ئۈچەي داچىسى بۇزۇلۇپ قازا قىلغان (ANOVA, F (3, 24) = 0.4903, P = 0.0144) f).بۇ نەتىجىلەر NLRP3 ياللۇغنىڭ G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىنىڭ كېسەللىك پەيدا قىلىش رولىنى تۆۋەنلىتىش رولىنى ئوينايدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ Giardia ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىدىكى رولى.چاشقانلار گاللانغان (IV) دا DuoDenoCocccal سىنىپى ۋە ئاندىن mcc950 (IP) بىلەن ياكى ئۇنىڭدىنمۇ كۆپ مۇئامىلە قىلىندى.PBS ياكى MCC950 بولغان يەككە داۋالاش گۇرۇپپىلىرى كونترول سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن.تەجرىبە گۇرۇپپىسى ۋە داۋالاش تۈزۈمى.b ھەر خىل داۋالاش گۇرۇپپىلىرىدىكى چاشقانلارنىڭ بەدەن ئېغىرلىقى 7 كۈن نازارەت قىلىندى.G. duodenalis يۇقۇملىنىش گۇرۇپپىسى بىلەن G. duodenalis + MCC950 يۇقۇملىنىشنى داۋالاش گۇرۇپپىسىنىڭ پەرقى SPSS يۇمشاق دېتالىنىڭ 22.0 نەشىرى ئارقىلىق t- سىناق ئارقىلىق ئانالىز قىلىندى.يۇلتۇزلار * P <0.05 ، ** P <0.01 ياكى *** P <0.001 دىكى كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى كۆرسىتىدۇ.c پارازىت يۈكى ئون ئىككى بارماق ئۈچەي سۇيۇقلۇقىدىكى تروفوزوئىتنىڭ سانىنى ھېسابلاش ئارقىلىق بېكىتىلدى.G. duodenalis يۇقۇملىنىش گۇرۇپپىسى بىلەن G. duodenalis + MCC950 يۇقۇملىنىشنى داۋالاش گۇرۇپپىسىنىڭ پەرقى SPSS يۇمشاق دېتالىنىڭ 22.0 نەشىرى ئارقىلىق t- سىناق ئارقىلىق ئانالىز قىلىندى.يۇلتۇزلار * P <0.05 دىكى كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى كۆرسىتىدۇ.d Hematoxylin ۋە eosin (H&E) داس بوشلۇقى ئۆسمىسىنىڭ داغلاش نەتىجىسى.قىزىل ئوقلار داچىنىڭ بۇزۇلغانلىقىنى ، يېشىل ئوقلار شىفىرنىڭ بۇزۇلغانلىقىنى كۆرسىتىدۇ.تارازىسى: 100 µm.e, f ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ ئېگىزلىكى ۋە مائۇسنىڭ شىفىرلىق ئېگىزلىكىنى ستاتىستىكىلىق تەھلىل قىلىش.يۇلتۇزلار * P <0.05 ۋە ** P <0.01 دىكى كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى كۆرسىتىدۇ.بۇ نەتىجىلەر 7 مۇستەقىل بىئولوگىيىلىك تەجرىبىدىن ئېلىنغان.BW ، بەدەن ئېغىرلىقىig ، ئىچكى قىسىمدىكى يەتكۈزۈش لىنىيىسىip, intraperitoneal يەتكۈزۈش يولى;ns ، مۇھىم ئەمەس (P> 0.05);PBS ، فوسفاتلىق بۇففېرلىق تۇزWT ، ياۋايى تىپ
IL-1β نىڭ ئاجرىلىپ چىقىشى ياللۇغلىنىشنىڭ ئالاھىدىلىكى.G. duodenalis alpha-2 giardine ۋە alpha-7.3 گىئاردېننىڭ NLRP3 ساھىبجامالنىڭ vivo دا قوزغىتىلىدىغان ياكى قوزغىتىلمىغانلىقىنى ئېنىقلاش ئۈچۈن ، بىز داۋالىمىغان WT چاشقانلىرى (نومۇس گۇرۇپپىسى) ۋە NLRP3 ياللۇغلانغان چاشقان (MCC950 چەكلەنگەن داۋالاش گۇرۇپپىسى) نى ئىشلەتتۇق.4a رەسىمدە سىناقنىڭ تەپسىلىي پىلانى كۆرسىتىلدى.تەجرىبە گۇرۇپپىلىرى PBS ، G. duodenalis خالتىلىق ئىششىقى بىلەن داۋالاش ، چاشقاننىڭ مۇسكۇلغا ئوكۇل قىلىنىشى ۋە pcDNA3.1 (+) - مۇسكۇلغا ئوكۇل ئوكۇلى - ئالفا -2 گىئاردېن ياكى pcDNA3.1-alfa-7.3 گىئاردېندىن تەركىب تاپقان.7-كۈنى ، قايتا ھاسىل بولىدىغان پلازما ئوكسىدنى باشقۇرۇشتىن كېيىن ، قان زەردابى يىغىۋېلىنىپ ، ھەر گۇرۇپپىدىكى IL-1β نىڭ دەرىجىسى بېكىتىلدى.4b رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، MOCK گۇرۇپپىسىدا: (i) PBS گۇرۇپپىسىغا سېلىشتۇرغاندا ، pcDNA3.1 داۋالاشنىڭ IL-1β ئاجرىلىپ چىقىشىغا كۆرۈنەرلىك تەسىر كۆرسىتەلمىدى (ANOVA, F (4.29) = 4.062 ، P = 0.9998) ، ئەمما ، G. duodenalis cyst گۇرۇپپىسى (ANOVA, F (4, 29) = 4.062 ، P = 0.0002) ، (ii) pcDNA3.1-alpha-2 giardine ۋە pcDNA3 دە IL-β نىڭ سۈمۈرۈلۈشى كۆرۈنەرلىك يۇقىرى كۆتۈرۈلدى.1- ئالفا 7.3 گىئاردېننىڭ مۇسكۇلغا ئوكۇل قىلىنىشى قان زەردابى IL-1β سەۋىيىسىنى كۆرۈنەرلىك ئاشۇردى (ANOVA, F (4, 29) = 4.062, P <0.0001);3) .MCC950 داۋالاش گۇرۇپپىسى ۋە MOCK گۇرۇپپىسىدىكى ھەر بىر گۇرۇپپىغا سېلىشتۇرغاندا: (i) PBS كونترول گۇرۇپپىسى ۋە pcDNA3.1 كونترول گۇرۇپپىسىدىكى IL-1β ئاجرىتىپ چىقىرىش دەرىجىسى MCC950 چەكلىگۈچنى توسۇۋالغاندىن كېيىن بەلگىلىك دەرىجىدە تۆۋەنلىدى ، ئەمما پەرق ئۇنداق ئەمەس. مۇھىم (PBS: ANOVA, F (9, 58) = 3.540, P = 0.4912 pcDNA3.1: ANOVA, F (9, 58) = 3.540, P = 0.5949);(2) MCC950 نى توسۇۋالغاندىن كېيىن., IL-1K inctions G. Duroddalis Cystl-2.1 Alver-2 Alver-2 Rapad-2 2 Gairdine گۇرۇپپىسىدا, PCDNA3.1 ALAPT- 7.3 گىچە ..3 گىچە گىچە. , 58) = 3.540, P = 0.0120; pcDNA3.1-alpha-2 giardine: ANOVA, F (9, 58) = 3.540, P = 0.0447; ) = 3.540, P = 0.0164).بۇ نەتىجىلەر ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېننىڭ vivo دىكى NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ ئاكتىپلىقىنى ۋاسىتە قىلىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
pcDNA3.1 (+) - گىئاردېنلار vivo دىكى NLRP3 ساھىبجامال ياللۇغىنى قوزغىتىدۇ.چاشقانلار قايتا ھاسىل بولغان ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش پلازمىسى pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 گىئاردېن ياكى pcDNA3.1 (+) - ئالفا-7.3 گىئاردېن بىلەن ئىممۇنىتېتلانغان (ئاندىن) ).PBS ياكى pcDNA3.1 (+) پىلازما داۋالاش گۇرۇپپىسى مەنپىي كونترول سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن ، G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينى داۋالاش گۇرۇپپىسى ئاكتىپ كونترول قىلىنغان.تەجرىبە گۇرۇپپىسى ۋە داۋالاش تۈزۈمى.b چاشقاندىكى IL-1β نىڭ قان زەردابى سەۋىيىسى 7-كۈنى ELISA تەكشۈرۈشى ئارقىلىق ئۆلچەنگەن.MOCK گۇرۇپپىسىدىكى گۇرۇپپىلارنىڭ پەرقى تاق يۆنىلىشلىك ANOVA ئارقىلىق ئانالىز قىلىندى ، MOCK گۇرۇپپىسى بىلەن MCC950 گۇرۇپپىسىنىڭ پەرقى SPSS يۇمشاق دېتالىنىڭ 22.0 نەشىرىنىڭ سىناق سىنىقى ئارقىلىق ئانالىز قىلىندى.Asterisks MOCK گۇرۇپپىسىدىكى داۋالاش گۇرۇپپىلىرىنىڭ كۆرۈنەرلىك پەرقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، * P <0.05 ۋە *** P <0.001;دوللار بەلگىسى ($) P <0.05 دىكى MOCK گۇرۇپپىسىدىكى ھەر بىر گۇرۇپپا بىلەن MCC950 گۇرۇپپىسىنىڭ كۆرۈنەرلىك پەرقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.يەتتە مۇستەقىل بىئولوگىيىلىك تەجرىبىنىڭ نەتىجىسى.i, ئومۇرتقا مۇسكۇلى ئوكۇلى ، ns ، كۆرۈنەرلىك ئەمەس (P> 0.05)
NLRP3 ساھىبجامال ياللۇغىنىڭ ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېن ئارقىلىق ۋاسىتىلىك قوزغىتىلىشىنىڭ G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىغا بولغان تەسىرىنى تەكشۈرۈش ئۈچۈن ، بىز WT C57BL / 6 چاشقاننى ئىشلىتىپ ، ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېننى ئوكۇل قىلدۇق.پىلازما مۇسكۇلغا ئوكۇل قىلىنغان ، 3 كۈندىن كېيىن G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي خالتىسىنىڭ ئاشقازان نەيچىسى ئارقىلىق ، چاشقانلار 7 كۈن كۆزىتىلگەن.5a رەسىمدە سىناقنىڭ تەپسىلىي پىلانى كۆرسىتىلدى.ھەر بىر چاشقاننىڭ بەدەن ئېغىرلىقى ھەر كۈنى ئۆلچەپ چىقىلدى ، يېڭى ئون ئىككى بارماق ئۈچەي توقۇلمىلىرىنىڭ ئەۋرىشكىسى ئاشقازان نەيچىسى ئارقىلىق باشقۇرۇلغاندىن كېيىن 7-كۈنى يىغىۋېلىندى ، تروفوزوئىتنىڭ سانى تەكشۈرۈلۈپ ، گىستوپولوگىيەلىك ئۆزگىرىشلەر كۆرۈلدى.5b رەسىمدە كۆرسىتىلگەندەك ، بېقىش ۋاقتىنىڭ ئېشىشىغا ئەگىشىپ ، ھەر گۇرۇپپىدىكى چاشقانلارنىڭ BW تەدرىجىي كۆپەيدى.چاشقاننىڭ MT سى 3-كۈنى G. duodenalis خالتىلىق ئىششىقىنى باشقۇرۇشتىن كېيىن تۆۋەنلەشكە باشلىغان ، ئاندىن ئاستا-ئاستا كۆپەيگەن.ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا 7.3 گىئاردېننىڭ مۇسكۇلغا ئوكۇل قىلىنىشىدىن كېلىپ چىققان NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ قوزغىتىلىشى چاشقانلارنىڭ ئورۇقلىشىنى كۆرۈنەرلىك كۈچەيتتى (1-كۈنى: pcDNA3.1-alpha-2 giardine, ANOVA, F (4, 30) = 1.399, P = 0. = 0.3172, P = 0.9979; 4 ، 30) = 0.8222 ، P = 0.0262 3-كۈنى: pcDNA3.1-alpha-7.3 giardine, ANOVA, F (4, 30) = 0.8222, P = 0.0083: 4-كۈنى . 2 گىئاردېن ، ئانوۋا ، F (4 ، 30) = 0.9728 ، P <0.0001 5-كۈنى: pcDNA3.1-alpha -7.3 گىئاردېن ، ئانوۋا ، F (4 ، 30) = 0.9728 ، P <0.0001 6-كۈن: pcDNA3 .1 - alpha-2 giardine, ANOVA, F (4, 30) = 0.7154, P = 0.0012, 6-كۈن: pcDNA3.1-alpha-7.3 گىئاردېن ، ANOVA, F (4, 30) = 0.7154, P = 0.0006;7-كۈنى: pcDNA3.1-alpha-2 giardine, ANOVA, F (4, 30) = 0.5369, P <0.0001 7-كۈنى: pcDNA3.1-alpha-7.3 گىئاردېن ، ئانوۋا ، F (4 ، 30) = 0.5369 ، P <0.0001).ئون ئىككى بارماق ئۈچەيدە پارازىت يۈك باھالانغان (5c رەسىم).بىر تەرەپ قىلىنمىغان ئاكتىپ كونترول قىلىش ۋە قۇرۇق pcDNA3.1 ۋېكتورى بىلەن ئوكۇل قىلىنغان گۇرۇپپىغا سېلىشتۇرغاندا ، α-2 گىئاردېن ۋە α-7,3 گىئاردېن (pcDNA3.1-alpha) ئوكۇل قىلىنغان گۇرۇپپىدا G. duodenalis trophozoites نىڭ سانى كۆرۈنەرلىك ئازايدى. -2 گىئاردېن: ئانوۋا ، F (3 ، 24) = 1.209 ، P = 0.0002 ، pcDNA3.1-alfa-7.3 گىئاردېن: ئانوۋا ، F (3 ، 24) = 1.209 ، P <0.0001).بۇنىڭدىن باشقا ، گىئاردېن ئالفا -3.HE داغلاشنىڭ نەتىجىسى ئەنجۈردە كۆرسىتىلدى.5d - f.ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېن بىلەن ئوكۇل قىلىنغان چاشقانلارنىڭ ئون ئىككى بارماق ئۈچەي توقۇلمىلىرى زەخىملەنگەن بولۇپ ، داس بوشلۇقىنىڭ بۇزۇلۇشى بىلەن ئىپادىلىنىدۇ ، G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەيگە ئوكۇل قىلىنغان چاشقانلار ۋە بوش ئورۇندىكى pcDNA3 ۋېكتورى بىلەن بىرلەشتۈرۈلگەن چاشقانلارغا سېلىشتۇرغاندا .1 چوڭايتىش.(pcDNA3.1-alpha-2 giardine: ANOVA, F (3, 24) = 2.466, P = 0.0035 ياكى P = 0.0068; . , F (3, 24) = 1.470, P = 0.0371 ياكى P = 0.0191).بۇ نەتىجىلەر ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا -3،3 گىئاردېننىڭ vivo دىكى NLRP3 ياللۇغىنى قوزغىتىش ئارقىلىق G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ يۇقۇملىنىشىنى ئازايتىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.
PcDNA3.1 (+) نىڭ رولى - G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىدىكى گىئاردېن.چاشقانلار قايتا ھاسىل بولىدىغان ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش پلازمىسى pcDNA3.1 (+) - ئالفا -2 گىئاردېن ياكى pcDNA3.1 (+) - ئالفا -7.PBS گۇرۇپپىسى ۋە pcDNA3.1 (+) + ئون ئىككى بارماق ئۈچەي خالتىلىق ئىششىقنى داۋالاش گۇرۇپپىسى مەنپىي كونترول گۇرۇپپىسى ، ئون ئىككى بارماق ئۈچەي خالتىلىق ئىششىقنى داۋالاش گۇرۇپپىسى ئاكتىپ كونترول گۇرۇپپىسى سۈپىتىدە ئىشلىتىلدى.تەجرىبە گۇرۇپپىسى ۋە داۋالاش تۈزۈمى.b ھەر خىل داۋالاش گۇرۇپپىلىرىدىكى چاشقانلارنىڭ MT سى رىقابەتتىن كېيىنكى 7 كۈن نازارەت قىلىندى.Asterisks G. duodenalis گۇرۇپپىسىدىكى گۇرۇپپىلار بىلەن pcDNA3.1 (+) - alpha-2 giardine گۇرۇپپىسى ، * P <0.05 ، ** P <0.01 ، ۋە *** P <0.001;دوللار بەلگىسى ($) ھەر بىر گۇرۇپپا G. duodenalis بىلەن pcDNA3.1 (+) - alpha-7.3 jardine گۇرۇپپىسى ، $$ P <0.01 ۋە $$$ P <0.001 ئارىسىدىكى كۆرۈنەرلىك پەرقنى كۆرسىتىدۇ.c پارازىت يۈكى ئون ئىككى بارماق ئۈچەي (ئۇزۇنلۇقى 3 سانتىمېتىر) دىن 1 مىللىلېتىر ئون ئىككى بارماق ئۈچەيدىكى تروفوزوئىتنىڭ سانىنى ھېسابلاش ئارقىلىق بېكىتىلدى ۋە ئون ئىككى بارماق ئۈچەيدىكى پارازىت قۇرتنىڭ سانى سۈپىتىدە ئىپادىلەندى.G. duodenalis يۇقۇملىنىش گۇرۇپپىسىنىڭ پەرقى ، pcDNA3.1 (+) - alpha-2 giardine گۇرۇپپىسى ۋە pcDNA3.1 (+) - alpha-7.3 گىئاردېن گۇرۇپپىسىنىڭ SPSS يۇمشاق دېتالىنىڭ 22.0 نەشىرى ئارقىلىق ئانالىز قىلىندى.Asterisks ** P <0.01 ۋە *** P <0.001 دىكى كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.d ئون ئىككى بارماق ئۈچەيدىكى تارىخشۇناسلىق ئۆزگىرىشى.قىزىل ئوقلار داچىنىڭ بۇزۇلغانلىقىنى ، يېشىل ئوقلار شىفىرنىڭ بۇزۇلغانلىقىنى كۆرسىتىدۇ.تارازىسى: 100 µm.e, f مائۇسنىڭ ئون ئىككى بارماق داچا ئېگىزلىكى (e) ۋە شىفىر ئېگىزلىكى (f) نىڭ ستاتىستىكىلىق ئانالىزى.1d رەسىمدىكى گۇرۇپپىلارنىڭ پەرقى SPSS يۇمشاق دېتالىنىڭ 22.0 نەشرىنى ئىشلىتىپ تاق يۆنىلىشلىك ANOVA تەرىپىدىن تەھلىل قىلىنغان.يۇلتۇزلار * P <0.05 ۋە ** P <0.01 دىكى كۆرۈنەرلىك پەرقلەرنى كۆرسىتىدۇ.يەتتە مۇستەقىل بىئولوگىيىلىك تەجرىبىنىڭ نەتىجىسى.ns, not significant (P> 0.05)
گىئارديا ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغى ئىنسانلار ۋە باشقا سۈت ئەمگۈچىلەرنىڭ ئۈچەيدىكى پارازىت قۇرت كېسىلى بولۇپ ، جىگەر ياللۇغىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.2004-يىلى ئۇ 6 يىلدىن بۇيان كەڭ تارقالغانلىقى ئۈچۈن ، دۇنيا سەھىيە تەشكىلاتى سەل قارالغان كېسەللىكلەر تەشەببۇسىغا كىرگۈزۈلدى ، بولۇپمۇ ئىجتىمائىي ئىقتىسادىي ئورنى تۆۋەن مەھەللىلەردە [32].تۇغما ئىممۇنىتېت سىستېمىسى G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىنىڭ ئىممۇنىتېت ئىنكاسىدا ھالقىلىق رول ئوينايدۇ.چاشقان ماكرو پەردىسىنىڭ تاشقى ھۈجەيرە توزاقلىرىنى قويۇپ G. duodenalis نى يۇتۇۋالغانلىقى ۋە ئۆلتۈرگەنلىكى خەۋەر قىلىنغان [33].ئىلگىرىكى تەتقىقاتىمىزدا كۆرسىتىلىشچە ، تاجاۋۇز قىلمايدىغان تاشقى ھۈجەيرە پارازىت قۇرتى G. duodenalis چاشقاننىڭ ماكرو پەردىسىدە p38 MAPK ، ERK ، NF-κB p65 ۋە NLRP3 ياللۇغلىنىش سىگنال يولىنى قوزغىتىپ ، ساھىبجاماللارنىڭ ياللۇغ قايتۇرۇش ئىنكاسىنى تەڭشەپ ، قويۇپ بېرىلگەن GEV بۇ جەرياننى كۈچەيتىشى مۇمكىن.13], 24].قانداقلا بولمىسۇن ، GEV دىكى NLRP3 ياللۇغلىنىش ئارقىلىق كونترول قىلىنىدىغان ياللۇغقا چېتىشلىق PAMP ۋە NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ گىئارد كېسەللىكىدىكى رولى تېخى ئېنىقلانمىدى.بۇ ئىككى سوئالنى يورۇتۇش ئۈچۈن ، بىز بۇ تەتقىقاتنى ئېلىپ باردۇق.
NLRP3 ياللۇغلىنىش ئىممۇنىتېت ھۈجەيرىسىنىڭ سىپوپلازمىسىغا جايلاشقان بولۇپ ، سۈيدۈك كىسلاتاسى خرۇستال ، زەھەرلىك ماددىلار ، باكتېرىيە ، ۋىرۇس ۋە پارازىت قۇرت قاتارلىق ھەر خىل زەررىچىلەر تەرىپىدىن قوزغىتىلىدۇ.باكتېرىيە تەتقىقاتىدا ، زەھەرلىك ماددىلار ياللۇغلىنىش سېنزورلىرىنى ئاكتىپلاشتۇرىدىغان ، ياللۇغلىنىش ۋە ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆلۈشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغان مۇھىم PAMP دەپ ئېنىقلانغان [34].قۇرۇلما جەھەتتە كۆپ خىللاشقان زەھەرلىك ماددىلار ، مەسىلەن ستافىلوككوك قۇتۇبىدىكى گېمولىن ۋە [35] ۋە ئېشېرىچيا كولى [36] ، ئېنتېروتوسىن (NHE) دىكى گېمولىنسىن BL (HBL) قاتارلىقلار NLRP3 ياللۇغىنى قوزغىتىدۇ.ۋىرۇس تەتقىقاتى شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، SARS-COV-2 كونۋېرت (E) ئاقسىلى [38] ۋە Zika ۋىرۇسى NS5 ئاقسىلى [39] قاتارلىق ۋىرۇسلۇق ئاقسىللار NLRP3 قوبۇل قىلغۇچى ئېتىراپ قىلغان مۇھىم PAMP.پارازىت قۇرت تەتقىقاتىدا ، نۇرغۇنلىغان پارازىت قۇرتلارنىڭ ساھىبجامال ياللۇغلىنىش بىلەن مۇناسىۋەتلىك ئىكەنلىكى خەۋەر قىلىنغان ، مەسىلەن توكوپلازما گوندى ، ترىخوموناس جىنسىي يولى ياللۇغى [40] ، تىرىپانوسوما كرۇزى [41] ۋە لېيشمانىيە [42].قويۇق دانچە ئاقسىل GRA35 ، GRA42 ۋە GRA43 بولۇپ ، توكوپلازما گوندىسىنىڭ ۋىرۇسى بىلەن مۇناسىۋەتلىك بولۇپ ، لېۋىس چاشقان ماكرو پەردىسىدە پىروپوز كېسىلىنىڭ پەيدا بولۇشى تەلەپ قىلىنىدۇ [43].ئۇنىڭدىن باشقا ، بىر قىسىم لېيشمانىيە تەتقىقاتى NLRP3 ياللۇغلىنىشقا قاتناشقان يەككە مولېكۇلاغا مەركەزلەشتى ، مەسىلەن پارازىت پەردىنىڭ قان تومۇر ئۆسمىسى [44] ياكى سىنىك مېتاللوپروتازا [45].گېنغا قوشۇلىدىغان ئالفا-گىئاردېن جەمەتى ئىچىدە ، ئالفا -1 گىئاردېننىڭ چاشقان مودېلىدا G. duodenalis نىڭ ئالدىنى ئالىدىغان يوشۇرۇن ۋاكسىنا نامزاتى ئىكەنلىكى ئىسپاتلاندى [18].تەتقىقاتىمىزدا ، ئالفا -2 ۋە ئالفا -3،3 گىگانت گېنى بار.بۇ ئىككى نىشان گېنى pcDNA3.1 (+) ئېۋكارىئوتىك ئىپادىلەش سىستېمىسى ۋېكتورىغا كلونلىنىپ ، ياللۇغلىنىشنى ئانالىز قىلدى.
چاشقىنەك مودېلىمىزدا ، يېرىلغان كاسپاز پارچىلىرى ياللۇغلىنىشنىڭ بەلگىسى رولىنى ئوينايدۇ.غىدىقلانغاندىن كېيىن ، NLRP3 ASC بىلەن ئۆز-ئارا تەسىر كۆرسىتىپ ، پراكپاسلارنى قوبۇل قىلىدۇ ۋە ئاكتىپ كاسپاز ھاسىل قىلىدۇ ، ئۇلار IL-1β ۋە IL-18 نى قوللايدىغان IL-1β ۋە IL-18 نى ئايرىم-ئايرىم ھالدا 18 گە ئايلاندۇرىدۇ.ياللۇغ قايتۇرىدىغان كاسپازا (كاسپازا -1 ، -4 ، -5 ۋە -11) تۇغما مۇداپىئەدە ئىنتايىن مۇھىم بولۇپ ، ياللۇغلىنىش ۋە پروگرامما خاراكتېرلىك ھۈجەيرە ئۆلۈش بىلەن شۇغۇللىنىدىغان سىستايىن ئاقسىلى ساقلانغان ئائىلە.كاسپازا -1 قانون ياللۇغى ئارقىلىق قوزغىتىلىدۇ [47] ، تىپىك بولمىغان ياللۇغلىنىشنىڭ شەكىللىنىشىدە كاسپازا -4 ، -5 ۋە -11 قاتارلىقلار يېرىلىدۇ [48].بۇ تەتقىقاتتا ، بىز چاشقاننىڭ ئەتراپىدىكى ماكرو پەردىسىنى مودېل قىلىپ ئىشلىتىپ ، G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغى بىلەن يۇقۇملىنىش تەتقىقاتىدا ساھىبجامال NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ بەلگىسى سۈپىتىدە p20 كاسپازا -1 تازىلانغان كاسپازا -1 نى تەكشۈردۇق.نەتىجىدە كۆرسىتىلىشچە ، نۇرغۇنلىغان ئالفا-گىئاردېنلار ياللۇغنىڭ تىپىك قوزغىتىلىشىغا مەسئۇل بولۇپ ، بۇ باكتېرىيە ۋە ۋىرۇسقا چېتىشلىق ئاچقۇچلۇق ۋىرۇس مولېكۇلاسىنىڭ بايقىلىشى بىلەن بىردەك.قانداقلا بولمىسۇن ، بىزنىڭ تەتقىقاتىمىز پەقەت دەسلەپكى ئېكران بولۇپ ، كلاسسىك بولمىغان ياللۇغنى قوزغىتالايدىغان باشقا مولېكۇلالار بار ، چۈنكى ئالدىنقى تەتقىقاتىمىز G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىدا كلاسسىك ۋە كلاسسىك بولمىغان ياللۇغنى بايقىغان [13].ھاسىل قىلىنغان p20 كاسپازا -1 نىڭ NLRP3 ياللۇغلىنىش بىلەن مۇناسىۋىتى بار-يوقلۇقىنى تېخىمۇ ئېنىقلاش ئۈچۈن ، بىز ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېننى چاشقاننىڭ ئەتراپىدىكى ماكروغا ئالماشتۇرۇپ ، مولېكۇلا ئاقسىلىنىڭ ئىپادىلىنىش دەرىجىسى ۋە ASC ئولىگومېرلىشىش دەرىجىسىنى ئېنىقلاپ ، α-giardins نىڭ ھەر ئىككىسىنىڭ ئاكتىپلىنىدىغانلىقىنى جەزملەشتۈردۇق. inflammasome NLRP3.بىزنىڭ نەتىجىمىز مانكو-پرىخودا قاتارلىقلار بىلەن ئازراق ئوخشىمايدۇ ، ئۇلار Caco-2 ھۈجەيرىسىنىڭ G. muris ياكى E. coli EPEC جىددىيلىكى بىلەن غىدىقلىنىشىنىڭ NLRP3 ، ASC ۋە كاسپازا -1 نىڭ فتور فېرمېنسىيىلىك دەرىجىسىنى ئاشۇرۇۋېتىدىغانلىقىنى دوكلات قىلدى. گەرچە كۆرۈنەرلىك بولمىسىمۇ ، G. muris ۋە E. coli نىڭ تەننەرخى قانداق قىلىپ ئۈچ خىل ئاقسىلنىڭ سەۋىيىسىنى ئۆستۈردى [49].بۇ خىل ئوخشىماسلىق بەلكىم Giardia تۈرى ، ھۈجەيرە لىنىيىسى ۋە دەسلەپكى ھۈجەيرىلەرنى تاللاشتىكى ئوخشىماسلىق سەۋەبىدىن بولۇشى مۇمكىن.بىز يەنە 5 ھەپتىلىك ئايال WT C57BL / 6 چاشقىنىدا MCC950 نى ئىشلىتىپ vivo تەكشۈرۈشىدە ئويۇن قويدۇق ، بۇلار G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەي ياللۇغىغا ئاسان گىرىپتار بولىدۇ.MCC950 كۈچلۈك ۋە تاللانغان كىچىك مولېكۇلا NLRP3 چەكلىگۈچ بولۇپ ، نانومولار قويۇقلۇقىدىكى كانون ۋە كانونسىز NLRP3 قوزغىتىشنى توسىدۇ.MCC950 NLRP3 قوزغىتىشنى چەكلەيدۇ ، ئەمما AIM2 ، NLRC4 ۋە NLRP1 ياللۇغلىنىش يولى ياكى TLR سىگنال يولىنى قوزغىتىشقا تەسىر كۆرسەتمەيدۇ [27].MCC950 NLRP3 قوزغىتىشنى توسىدۇ ، ئەمما NLRP3 قوزغىتىشنى ، K + efflux ، Ca2 + ئېقىشىنى ياكى NLRP3 بىلەن ASC نىڭ ئۆز-ئارا تەسىر قىلىشىنى چەكلىمەيدۇ.ئەكسىچە ، ئۇ ASC oligomerization نى توسۇش ئارقىلىق NLRP3 ياللۇغلىنىشنى قوزغىتىدۇ.شۇڭلاشقا ، بىز vivo تەتقىقاتىدا MCC950 نى ئىشلىتىپ ، NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ گىئاردېن ئوكۇلىدىن كېيىنكى رولىنى ئېنىقلىدۇق.ئاكتىپلانغان كاسپازا -1 p10 ياللۇغ قايتۇرىدىغان سىتوكىنلارنى IL-1β ۋە IL-18 نى يېتىلگەن IL-1β ۋە IL-18 غا ئايلاندۇرىدۇ [50].بۇ تەتقىقاتتا ، MCC950 بار ياكى ئىشلىتىلمىگەن گىگانت داۋالانغان چاشقانلاردىكى قان زەردابى IL-1β سەۋىيىسى NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ قوزغىتىلغان ياكى قوزغىتىلمىغانلىقىنىڭ كۆرسەتكۈچى سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن.ئويلىغىنىدەك ، MCC950 داۋالاش قان زەردابى IL-1β سەۋىيىسىنى كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلەتتى.بۇ سانلىق مەلۇماتلار G. duodenalis giardin alfa-2 ۋە giardin alfa-7.3 نىڭ NLRP3 مائۇس ياللۇغىنى قوزغىتالايدىغانلىقىنى ئېنىق كۆرسىتىپ بەردى.
ئۆتكەن ئون يىلدا توپلانغان مۇھىم سانلىق مەلۇماتلار IL-17A نىڭ G. مۇرىسقا قارشى ئىممۇنىتېتنى كونترول قىلغۇچى ، IL-17RA سىگنالىنى قوزغاپ ، مىكروبقا قارشى پېپتىد ئىشلەپ چىقىرىدۇ ۋە تولۇقلاشنى قوزغىتىشنى تەڭشەيدىغانلىقىنى كۆرسەتتى.قانداقلا بولمىسۇن ، گىئارديا بىلەن يۇقۇملىنىش ياش قۇرامىغا يەتكەنلەردە كۆپ كۆرۈلىدۇ ، خەۋەر قىلىنىشىچە ، ياش چاشقانلاردىكى گىئارديا يۇقۇملىنىش IL-17A ئىنكاسىنى قوزغىتىپ ، ئۇنىڭ قوغداش رولىنى جارى قىلدۇرمايدىكەن ، تەتقىقاتچىلار باشقا ئىممۇنىتېتنى كونترول قىلغۇچى گىئارديانى ئىزدەشكە ئۈندەيدىكەن.يۇقۇملىنىش مېخانىزىمى.يېقىنقى تەتقىقاتنىڭ ئاپتورلىرى G. muris نىڭ E. coli EPEC نىڭ NLRP3 ياللۇغىنى قوزغىتالايدىغانلىقىنى ، بۇ مىكروبقا قارشى پېپتىدلارنىڭ ئىشلەپچىقىرىلىشىنى ئىلگىرى سۈرۈپ ، ئۇنىڭ ئۈچەي يولىدىكى قېتىشىش ئىقتىدارىنى ۋە تروفوزوئىتنىڭ سانىنى ئازايتىدىغانلىقىنى ، بۇ ئارقىلىق چوڭ ئۈچەينىڭ ئېغىرلىقىنى تۆۋەنلىتىدىغانلىقىنى دوكلات قىلدى. باكتېرىيە كەلتۈرۈپ چىقارغان كېسەللىكلەر [49].NLRP3 ياللۇغى ھەر خىل كېسەللىكلەرنىڭ تەرەققىياتىغا قاتنىشىدۇ.تەتقىقاتلاردا ئىسپاتلىنىشىچە ، Pseudomonas aeruginosa ھۈجەيرە ئۆلۈشنىڭ ئالدىنى ئېلىش ئۈچۈن ماكروفادا ئاپتوماتىك فوكۇسنى قوزغايدۇ ، بۇ جەريان NLRP3 ياللۇغىنىڭ قوزغىتىلىشىغا باغلىق [53].N. كانايغا نىسبەتەن ، NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ ئاكتىپلاشتۇرۇلغان ئوكسىگېن تۈرىنىڭ ۋاستىسى بىلەن قوزغىتىلىشى ئۇنىڭ ساھىبجامالدا كۆپىيىشىنى چەكلەپ ، ئۇنى داۋالاشتىكى يوشۇرۇن نىشانغا ئايلاندۇرىدۇ [9].Paracoccidioides brasiliensis چاشقاننىڭ سۆڭەك يىلىمىدىن ھاسىل بولغان ھەزىم قىلىش ھۈجەيرىسىدە NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ قوزغىلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، نەتىجىدە ساھىبجامال مۇداپىئەدە ھالقىلىق رول ئوينايدىغان ياللۇغلىنىش سىتوكىن IL-1β قويۇپ بېرىلىدۇ [10].L. amazonensis ، L. major ، L. braziliensis ۋە L. infantum chagasi قاتارلىق بىر قانچە لېيشمانىيە تۈرى ماكرو شەكىلدە NLRP3 ۋە ASC غا تايىنىدىغان كاسپازا -1 نى قوزغىتىدۇ ، شۇنداقلا لېيشمانىيەدىن يۇقۇملىنىدۇ.NLRP3 / ASC / caspase-1 گېنىدىكى چاشقان كەمچىل بولغاندا پارازىت كۆپەيتىش كۈچەيتىلىدۇ [11].زامبونى قاتارلىقلار.لېيشمانىيەدىن يۇقۇملىنىشنىڭ ماكرو شەكىلدە NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ قوزغىلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغانلىقى خەۋەر قىلىنغان بولۇپ ، بۇ ھۈجەيرە ئىچىدىكى پارازىت قۇرتنىڭ كۆپىيىشىنى چەكلەيدۇ.شۇڭا ، لېيشمانىيە ئالدىنى ئېلىش ئىستراتېگىيىسى سۈپىتىدە NLRP3 قوزغىتىشنى چەكلىشى مۇمكىن.Vivo تەتقىقاتىدا ، NLRP3 ياللۇغلىنىش لېيشمانىيەنىڭ يوقىلىشىغا تۆھپە قوشقان ، ئەمما توقۇلمىلارغا تەسىر كۆرسەتمىگەن [54].ئەكسىچە ، قان تومۇر ئۆسمىسى تەتقىقاتىدا ، NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ قوزغىتىلىشى ساھىبجامالنىڭ ئاشقازان-ئۈچەيدىكى قان تومۇر ئۆسمىسىدىن مۇداپىئەلىنىش ئىممۇنىتېتنى باستۇرۇپ قويدى [12].شىگېللا دۇنيا مىقياسىدا ئىچ سۈرۈشنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغان ئاساسلىق باكتېرىيەنىڭ بىرى.بۇ باكتېرىيە P2X7 قوبۇل قىلغۇچى ۋاسىتىچى K + ئېففۇكىس ، ئاكتىپ ئوكسىگېن تۈرى ، لىزوسومال كىسلاتا ۋە خوندىرىئوسوملۇق بۇزۇلۇش ئارقىلىق IL-1β ئىشلەپچىقىرىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.NLRP3 ياللۇغلىنىش ماكرو ھۈجەيرىلەرنىڭ شىگېللاغا قارشى فاكوسېتوز ۋە باكتېرىيە ئۆلتۈرۈش ھەرىكىتىنى پاسسىپ تەڭشەيدۇ [55].پلازمامىن تەتقىقاتىدا كۆرسىتىلىشىچە ، AIM2 ، NLRP3 ياكى كاسپازا -1 كەمتۈك چاشقانلار پلازمامىن بىلەن يۇقۇملانغان بولۇپ ، يۇقىرى دەرىجىدىكى 1 تىپلىق ئىنتېرفېرون ھاسىل قىلىدۇ ۋە پلازما ئوكسىد بىلەن يۇقۇملىنىشقا قارشى تۇرىدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا-7.3 گىئاردېننىڭ چاشقاندىكى NLRP3 ياللۇغلىنىشنىڭ كېسەللىك قوزغاتقۇچنى قوزغىتىشتىكى رولى ئېنىق ئەمەس.
بۇ تەتقىقاتتا ، MCC950 نىڭ NLRP3 ياللۇغلىنىشىنى چەكلەش BW نى ئازايتىپ ، چاشقانلارنىڭ ئۈچەي يولى سۇيۇقلۇقىدىكى تروپوزوئىتنىڭ سانىنى كۆپەيتىپ ، ئون ئىككى بارماق ئۈچەي توقۇلمىلىرىدا تېخىمۇ ئېغىر كېسەللىك ئۆزگىرىشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى.ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا -3.بۇ نەتىجىلەر G. duodenalis نىڭ ئالفا -2 گىئاردېن ۋە ئالفا -3،3 گىئاردېن ئارقىلىق NLRP3 ساھىبجامال ياللۇغىنى قوزغىتىپ ، چاشقاندىكى G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ كېسەللىك قوزغىلىش نىسبىتىنى تۆۋەنلىتىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
كوللىكتىپ ھالدا ، بىزنىڭ نەتىجىمىز شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، ئالفا -2 ۋە ئالفا-7.3 گىگانتلىرى NLRP3 ساھىبجامال ياللۇغىنى قوزغىتىپ ، چاشقاندىكى G. ئون ئىككى بارماق ئۈچەينىڭ يۇقۇملىنىشىنى ئازايتىدۇ.شۇڭلاشقا ، بۇ مولېكۇلالار يۈرەك كېسىلىنىڭ ئالدىنى ئېلىشتىكى نىشانلارنى ئۈمىد قىلىدۇ.
       Data supporting the results of this study can be obtained from the respective author at gongpt@jlu.edu.cn.
لياڭ AKS ، لياڭ AAM ، خۇاڭ AHC ، سېرگى KM ، كام JKM.Giardiasis: ئومۇمىي چۈشەنچە.يېقىندا پات يۇقۇملىنىشنىڭ زەھەرلىك چېكىملىككە بولغان سەزگۈرلۈكى ئاشكارىلاندى.2019; 13: 134–43.
Escobedo AA, Tsimerman S. Giardiasis: دورىگەرلىك تەكشۈرۈشى.دورىگەرنىڭ مۇتەخەسسىسلەرنىڭ پىكىرى.2007;8: 1885–902.
تيەن خۇافېڭ ، چېن بىن ، ۋېن جيەنفېڭ.Giardiasis ، زەھەرلىك چېكىملىككە قارشى تۇرۇش ۋە يېڭى نىشانلارنىڭ بايقىلىشى.قالايمىقان دورا نىشانلىرىنى يۇقۇملاندۇرىدۇ.2010; 10: 295–302.
ۋاڭ Z ، جاڭ X ، شياۋ يى ، جاڭ ۋ ، ۋۇ X ، چىن T قاتارلىقلار NLRP3 ياللۇغلىنىش ۋە ياللۇغلىنىش كېسەللىكلىرى.ئوكسىد مېد ھۈجەيرىسى ئۇزۇن.2020 ؛ 2020: 4063562.
چېن GY ، Núñez G. ئۈچەي ياللۇغى ۋە راكتىكى ياللۇغنىڭ رولى.Gastroenterology.2011;141: 1986–99.
Pellegrini C, Antonioli L, Lopez-Castejon G, Blandizzi C, Fornai M. Canonical ۋە تىپىك بولمىغان NLRP3 ئىممۇنىتېتقا چىداملىق ۋە ئۈچەي ياللۇغىنىڭ كېسىشىش ئېغىزىدىكى ئاكتىپلاش.ئىممۇنىتېت كۈچى.2017; 8: 36.
لى ل ، ۋاڭ XC ، گوڭ PT ، جاڭ ن ، جاڭ X ، لى س قاتارلىقلار.ROS ۋاسىتىلىك NLRP3 ياللۇغلىنىشنى قوزغىتىش N. كاناي يۇقۇملىنىشقا تاقابىل تۇرۇشقا قاتناشقان.پارازىت ۋېكتور.2020; 13: 449.